[发明专利]DNA免疫吸附剂在制备抗ds-DNA抗体检测试剂中的应用

说明书

本发明公开了DNA免疫吸附剂在制备抗ds‑DNA抗体检测试剂中的应用。本发明DNA免疫吸附剂在制备抗ds‑DNA抗体检测试剂中的应用，是基于本发明发明人发现将DNA免疫吸附剂用于免疫荧光，可定性分析肾组织中沉积的抗ds‑DNA抗体，同时可特异性确认抗ds‑DNA抗体在肾组织中的沉积和分布，且方法简单易操作，适于制备检测和分析狼疮肾和红斑狼疮的试剂。

技术领域

本发明属于DNA免疫吸附剂的应用，特别涉及DNA免疫吸附剂在制备抗ds-DNA抗体检测试剂中的应用。

背景技术

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是一种多系统损害的慢性自身性免疫性疾病，确切病因不明，常引起多器官系统的不可逆性损害，可累及皮肤、浆膜、关节、肾及中枢神经系统等，病理表现为自身抗体及免疫复合物沉积，影响患者的寿命和生活质量。SLE的患病率因人群而异，我国患病以女性多见，尤其是育龄女性。患者血清中出现以抗核抗体(ANA)、抗双链DNA抗体(抗ds-DNA抗体)为代表的多种抗体，其中抗ds-DNA抗体是参与SLE发病的主要抗体，其特异性可达90％，是SLE特异性抗体，与疾病的活动性明显相关。

抗ds-DNA抗体，结合临床症状和其它实验检查结果，可辅助诊断系统性红斑狼疮(SLE)以及狼疮肾的分型。在多种结缔组织疾病中，都可以检测到抗核抗体(ANA)，抗核抗体的筛查是一种灵敏的结缔组织疾病检测方法。尽管这种筛查方法对于SLE是一种非常好的检测方法(阴性结果可以排除活动性SLE)，但是这种方法不是一种特异性的检查方法。在SLE患者中，抗ds-DNA抗体几乎可以排除其他疾病的可能性，因此该抗体被认为是该疾病的标志。抗dsDNA抗体阳性足以证明SLE；但是，这些抗体的检测阴性并不能在所有的病例当中完全排除SLE。

目前，临床上检测肾组织的病变和分型最常使用的为苏木精—伊红(HE)染色方法，免疫荧光的方法也被用来检测肾组织中的多种抗体沉积。但是HE染色和普通的免疫荧光并不能特异性确认抗ds-DNA抗体在肾组织中的沉积和分布。因此，提供一种简单快捷，既能诊断肾脏病变又能分析肾切片中抗ds-DNA抗体的检测方法对于狼疮肾炎和红斑狼疮的诊断和治疗非常重要。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供DNA免疫吸附剂在制备抗ds-DNA抗体检测试剂中的应用。

本发明的另一目的在于提供一种用于荧光免疫染色的抗ds-DNA抗体检测试剂。

本发明的再一目的在于提供上述用于荧光免疫染色的抗ds-DNA抗体检测试剂在非诊断目的的肾切片检测中的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：DNA免疫吸附剂在制备抗ds-DNA抗体检测试剂中的应用，是基于本发明发明人发现将DNA免疫吸附剂用于免疫荧光，可定性分析肾组织中沉积的抗ds-DNA抗体，特异性确认抗ds-DNA抗体在肾组织中的沉积和分布，方法简单易操作。

所述的DNA免疫吸附剂为DNA负载在二氧化硅纳米粒子上得到的DNA免疫吸附剂；优选为DNA负载在介孔二氧化硅纳米粒子上得到的DNA免疫吸附剂(DNA-MSNs)和DNA负载在实心二氧化硅纳米粒子上得到的DNA免疫吸附剂(DNA-SiO₂)中的一种或至少两种；更优选为DNA负载在介孔二氧化硅纳米粒子上得到的DNA免疫吸附剂(DNA-MSNs)。

所述的DNA免疫吸附剂通过如下步骤制备得到：将二氧化硅纳米粒子表面修饰氨基和羧基，再加入催化剂和DNA混合，反应，得到DNA免疫吸附剂。

所述的二氧化硅纳米粒子优选为介孔二氧化硅纳米粒子(MSNs)和实心二氧化硅纳米粒子(SiO₂)中的一种或至少两种；更优选为介孔二氧化硅纳米粒子(MSNs)。

所述的用于与抗ds-DNA抗体结合的DNA优选为双链DNA；更优选为小牛胸腺DNA。