[发明专利]从南山茶中提取白杨素-8-C-β-D-葡萄糖苷的方法

说明书

本发明提供了一种从南山茶中提取白杨素‑8‑C‑β‑D‑葡萄糖苷的方法。所述方法:将南山茶饼经过浸提上样至大孔树脂层析柱，梯度洗脱后收集15％乙醇水溶液洗脱的洗脱液，经后处理得粗组分液；上样至聚酰胺树脂层析柱，梯度洗脱收集含有目标化合物的洗脱液，浓缩冻干得到粗提取物；使用高效液相色谱仪、C18HCE色谱柱进行DAC制备，得到粗分离物；使用高效液相色谱仪、C18ME色谱柱、用体积分数为19％的乙腈水溶液作为流动相，进行等度洗脱，收集含有目标化合物的流份段，浓缩冻干得到目标化合物；本申请提供的方法，首次从山茶属植物中有效分离出目标化合物，提取纯度高。

技术领域

本发明涉及化合物提取领域，具体而言，涉及一种从南山茶中提取白杨素-8-C-β-D-葡萄糖苷的方法。

背景技术

南山茶又名广宁红花油茶(Camellia semiserrata Chi.)，属于山茶科(Theaceae)山茶属(Camellia L.)植物，多年生乔木或灌木。南山茶主要分布在我国的广西东南部以及广东西部。它是油茶的一种重要栽培物种。经研究比较发现，在各类油茶中，广宁红花油茶中的化学成分相对比较丰富。

南山茶及其饼粕尤其富含具有多种生物活性的黄酮类和皂苷等化合物。目前，对油茶饼粕的研究主要集中在以总黄酮或皂苷为指标进行的各种提取工艺的优化，还有一些着重于对得到的粗提物或初步纯化物进行抗氧化以及抑菌等活性方面的研究。但是，对提取物中具体成分的研究不够。

白杨素是一种具有广泛药理活性的黄酮类化合物，它具有抗氧化、抗肿瘤、抗癌、抗病毒、抗高血压、抗糖尿病、抗菌、抗过敏等广泛的药理生理活性，是新药开发研究中一个非常重要的资源。

分析南山茶中的有效活性物质，将其活性成分从复杂多样的成分中分离提取出来，得到纯度较高的产品，对于南山茶的深度开发具有重要的作用。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从南山茶中提取白杨素-8-C-β-D-葡萄糖苷的方法，所述方法首次从南山茶中提取出目标化合物，而且快速有效、纯度很高。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种从南山茶中提取白杨素-8-C-β-D-葡萄糖苷的方法，所述方法包括以下步骤:

A.将南山茶饼经过浸提处理得到样品液；

B.将所述样品液湿法上样至大孔树脂层析柱，依次用体积分数为5％、15％、50％、95％的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集用所述15％乙醇水溶液洗脱的洗脱液，经后处理得粗组分液；

C.将所述粗组分液湿法上样至聚酰胺树脂层析柱，依次用蒸馏水、体积分数为20％、40％、90％的乙醇水溶液进行梯度洗脱，经色谱检测，收集含有目标化合物的洗脱液，浓缩冻干得到粗提取物；

D.将所述粗提取物用第一溶剂溶解后进样，使用高效液相色谱仪、C18HCE色谱柱进行DAC制备，用甲醇水溶液作为流动相进行等度洗脱，收集含有所述目标化合物的流份段，浓缩冻干得到粗分离物；

E.将所述预分离物用第二溶剂溶解后进样，使用高效液相色谱仪、第一C18ME色谱柱进行半制备，用体积分数为19％的乙腈水溶液作为流动相，进行等度洗脱，收集含有所述目标化合物的流份段，浓缩冻干得到所述目标化合物；所述目标化合物的结构式为：

根据南山茶浸提液中的主要成分及目标化合物的性质，采用浸提-萃取-大孔树脂柱层析-C18ME色谱柱洗脱后处理-聚酰胺树脂柱层析-DAC(动态轴向压缩)制备-C18ME色谱柱高效液相色谱制备的方法，有效将目标化合物从南山茶的复杂成分中分离出来。