[发明专利]一种检测天麻及其提取物和含天麻制剂中多种成分的方法

说明书

本发明提供了一种快速同时测定天麻药材及天麻提取物和含天麻制剂中的多种活性成分的UPLC方法，采用色谱柱Luna C18‑HST(2.5μm，100×3.0mm)；流动相：流动相A(CH₃CN)‑流动相B(H₂O+0.05％H₃PO₄)梯度洗脱；流速0.4mL·min^‑1；柱温35℃；检测波长220nm；进样体积1μL；分析时间10min。结果:各成分即天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、对羟基苯甲醛、香草醛达到基线分离，线性关系良好，平均加样回收率在99.79％～101.45％之间，RSD在1.10％～1.75％之间。实验结果表明该方法稳定、快速、可靠，可快速同时定性或定量测定天麻药材、天麻提取物或含天麻制剂中的多种活性成分。

技术领域

本发明属于医药领域，涉及中药材活性成分的检测技术，具体涉及天麻及其提取物和含天麻制剂中八种活性成分的快速定性以及定量方法。

背景技术

2015版的《中国药典》规定，天麻为兰科植物天麻(Gastrodia elata BI.)的干燥块茎【参见：中国药典[S].一部.2015】。在我国，主要分布在四川、云南、贵州、陕西等地，黑龙江、吉林也有少量分布。目前对于天麻中活性成分的研究表明天麻具有以下药理作用，镇静【参见：Zou N,Jian-Tao L V,Xue R Y,et al.Effects of Gastrodin on Sedation andHypnosis of Mice[J].Lishizhen MedicineMateria Medica Research,2011,22(4):807-809.Cao H Z,Chi M H,Qian Y R.Effects of Gastrodia Elata on the expressionTH and DBH mRNA in hypothalamus and adrenal gland of rats[J].Medical Journalof Chinese Peoples Health,2012.】、抗惊厥【参见：Ha J H,Lee D U,Lee J T,et al.4-Hydroxybenzaldehyde from Gastrodia elata B1.is active in the antioxidationand GABAergic neuromodulation of the rat brain.[J].Journal ofEthnopharmacology,2000,73(1):329-333.】、抗焦虑和抗抑郁【参见：Jung J W,Yoon B H,Oh H R,et al.Anxiolytic-like effects of Gastrodia elata and its phenolicconstituents in mice[J].BiologicalPharmaceutical Bulletin,2006,29(2):261.Zhou B H,Li X J,Liu M,et al.Antidepressant-like activity of the Gastrodiaelata ethanol extract in mice.[J].Fitoterapia,2006,77(7):592-594】、神经保护【参见：Kim H J,Lee S R,Moon K D.Ether fraction of methanol extracts of Gastrodiaelata,medicinal herb protects against neuronal cell damage after transientglobal ischemia in gerbils[J].Phytotherapy Research Ptr,2003,17(8):909.LeeGH,Kim HR,Han SY,et al.Gastrodia elata Blume and its pure compounds protectBV-2microglial-derived cell lines againstβ-amyloid:the involvement ofGRP78and CHOP[J].Biological Research,2012,45(4):403.Lee Y K,Woo M H,Kim C H,et al.Two new benzofurans from Gastrodia elata and their DNA topoisomerases Iand II inhibitory activities.[J].Planta Medica,2007,73(12):1287-1291.】等作用。在疾病治疗的过程中，并不是某一种成分起作用，而是多种活性成分协同作用于疾病，从而达到治疗作用。此外，产地不同、批次不同导致中药成分含量不一的情况也很普遍，药典中仅用一种或两种指标成分作为质量标准并不能真正反映该药材的质量。另外，在许多经典名方、汤剂和复方制剂中，天麻也是常见的药材之一【参见：熊兴江,王阶.论半夏白术天麻汤在高血压病中的运用[J].中华中医药杂志,2012(11):2862-2865.Kailan H E,Zhang P,Liu X.Tianma Injection in the Treatment of Vertebral Basilar ArteryInsufficiency Randomized Parallel Group Study[J].Journal of PracticalTraditional Chinese Internal Medicine,2014.】。因此，同时测定天麻中的多种活性成分可对于该药材的质量控制和应用提供参考依据，同时也为含有天麻的真伪品和复方制剂提供鉴别参考依据。目前，国内对于天麻成分测定主要采用HPLC法对于天麻素进行检测【参见：Jiao H.Determination of Gastrodin Contents in Wild and CultivatedGastrodia elata from Different Regions of Chongqing by RP-HPLC[J].MedicinalPlant,2012(5).】，该方法具有用时长，有机溶液耗损多等缺点，因此，建立一种可以快速，稳定，环境友好并能适用于不同产地天麻及其提取物或含有天麻的复方制剂的定性定量分析研究的天麻检测方法是本领域的重要课题。