[发明专利]一种双功能溶瘤病毒及其应用

权利要求书

1.一种双功能溶瘤病毒，其特征在于所述双功能溶瘤病毒在溶瘤病毒的分子结构中插入一种或几种表达免疫检查点阻断剂的功能片段，所述溶瘤病毒为小RNA病毒。

2.如权利要求1所述的双功能溶瘤病毒,其特征在于所述小RNA病毒包含肠病毒属、鼻病毒属、肝病毒属、副肠孤病毒属、嵴病毒属。

3.如权利要求2所述的双功能溶瘤病毒,其特征在于所述肠病毒属包括脊髓灰质炎病毒、肠病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒。

4.如权利要求3所述的双功能溶瘤病毒,其特征在于所述柯萨奇病毒包括柯萨奇A组病毒和柯萨奇B组病毒。

5.如权利要求4所述的双功能溶瘤病毒,其特征在于所述柯萨奇病毒为柯萨奇B3病毒。

6.如权利要求1所述的双功能溶瘤病毒,其特征在于所述免疫检查点阻断剂为抑制性免疫共刺激分子的受体PD-1、KIR、LAG3、TIM3、A2aR、CTLA-4、BTLA或配体PD-L1、PD-L2、CD80、CD86、CD155、B7-H3、B7-H4、B7-H5、HVEM、GAL9、MHC class I or II的抗体或具有抗原结合部位的片段或其组合。

7.如权利要求6所述的双功能溶瘤病毒，其特征在于所述具有抗原结合部位的片段为Fab或scFv。

8.如权利要求1-7任一项所述的双功能溶瘤病毒，其特征在于保持小RNA病毒分子基本结构，在病毒元件之间插入表达免疫检查点阻断剂的基因。

9.如权利要求1所述的双功能溶瘤病毒,其特征在于所述溶瘤病毒为柯萨奇B3病毒，所述表达免疫检查点阻断剂为PD-1的抗体或具有PD-1抗原结合部位的片段或其组合。

10.如权利要求9所述的双功能溶瘤病毒,其特征在于所述表达免疫检查点阻断剂为抗人PD-1的scFv序列。

11.如权利要求10所述的双功能溶瘤病毒,其特征在于柯萨奇B3病毒H3株基因组序列的5’非翻译区和蛋白P1区之间插入抗人PD-1单克隆抗体scFv序列。

12.如权利要求11所述的双功能溶瘤病毒,其特征在于所述抗人PD-1单克隆抗体scFv序列核苷酸序列如SEQ ID No：5所示。

13.如权利要求9所述的双功能溶瘤病毒,其特征在于其感染性克隆的序列如SEQ IDNo.11所示。

14.如权利要求1-13任一项所述的双功能溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物中的应用。

15.如权利要求14所述的应用，其特征在于所述肿瘤选自骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头或颈癌、皮肤或眼内恶性黑素瘤、子宫癌、卵巢癌、直肠癌、肛区癌、胃癌、睾丸癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌、阴道癌、阴户癌、何杰金氏病、非何杰金氏淋巴瘤、食道癌、小肠癌、内分泌系统的癌症、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、慢性或急性白血病、膀胱癌、肾或输尿管癌、肾盂癌、中枢神经系统的赘生物、原发性CNS淋巴瘤、肿瘤血管发生、脊髓轴肿瘤、脑干胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西氏肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌或T细胞淋巴瘤。

16.一种抗肿瘤药物，其特征在于含有权利要求1-13任一项所述的双功能溶瘤病毒。

17.如权利要求16所述的抗肿瘤药物，其特征在于通过肿瘤内、肠胃内外、皮下、口腔、表皮、皮内、肌肉内、腹膜内、血管内、鼻腔、眼内、气管内、肠内或耳内给药。