[发明专利]使用血清中卵泡抑素样蛋白-1辅助评估早期类风湿关节炎的研究方法

权利要求书

1.一种使用血清中卵泡抑素样蛋白-1辅助评估早期类风湿关节炎的研究方法，其特征在于，包括：

(1)使用非抗凝管静脉抽取早期类风湿关节炎患者的血液3-4毫升，自然凝结分离出血浆；

(2)利用ELISA试剂盒检测其中FSTL1蛋白的表达水平；

(3)将检测到的FSTL1蛋白的表达数据与正常人的FSTL1表达范围作对比。

2.根据权利要求1所述的使用血清中卵泡抑素样蛋白-1辅助评估早期类风湿关节炎的研究方法，其特征在于，所述步骤(2)具体包括：

(2.1)检测前一晚包被96孔板用于ELISA，用PBS缓冲液将捕获抗体稀释至工作浓度，按照每孔100μL加入96孔板中，用封板膜封闭后室温过夜；

(2.2)检测当天先将孔中的液体吸除，进行板清洗；最后在每孔中加入300μL的试剂稀释液，室温封闭至少1个小时，重复一遍之前的板清洗步骤；

(2.3)提前将样品从-80℃冰箱取出，冰上溶解，然后按照说明书梯度稀释试剂盒内附带的人FSTL1标准品蛋白，于15分钟内将100μL的标准品及检测样品依次加入之前包被好的96孔中，用封板膜封闭后室温孵育2小时；

(2.4)先将孔中的液体吸除，然后进行板清洗；每孔加入100μL稀释好的检测抗体，用封板膜封闭后室温孵育2小时；

(2.5)先将孔中的液体吸除，然后进行板清洗；每孔加入100μLHRP藕联的链霉亲和素溶液，避光孵育20分钟；

(2.6)先将孔中的液体吸除，然后进行板清洗；每孔加入100μL的显色底物溶液，避光孵育20分钟；每孔加入50μL的终止溶液，轻拍96孔板混合均匀；立即使用微板光度计于450nm处读取吸光度值，进行数据分析，得到FSTL1蛋白的表达数据。

3.根据权利要求2所述的使用血清中卵泡抑素样蛋白-1辅助评估早期类风湿关节炎的研究方法，其特征在于，步骤(2.2)、步骤(2.4)、(2.5)、(2.6)中，进行孔板清洗的方法为：每孔加入400μL清洗缓冲液清洗3遍，每一遍都用吸引器将孔中的清洗缓冲液吸干或者在纸巾上拍干。

4.血清中卵泡抑素样蛋白-1在早期类风湿关节炎诊断中的应用，其特征在于，将血清中卵泡抑素样蛋白-1作为诊断早期类风湿关节炎的生物标记物，早期类风湿关节炎患者血清中的卵泡抑素样蛋白-1的浓度高于正常范围。