[发明专利]乙型肝炎病毒前S1抗原特异性单链抗体及其应用

说明书

本发明涉及生物制品检测技术领域，公开了一种乙型肝炎病毒前S1抗原（HBV preS1）特异性单链抗体及其应用，该单链抗体包括轻链可变区、重链可变区、连接所述轻链可变区与所述重链可变区的接头以及任选的标签，其中，所述轻链可变区的序列如SEQ ID NO：1的第1‑117位氨基酸所示，所述重链可变区的序列如SEQ ID NO：1的第130‑262位氨基酸所示。本发明还公开了上述单链抗体的相关应用。本发明的单链抗体为全人源单链抗体，能和乙型肝炎病毒前S1抗原特异性结合。

技术领域

本发明涉及生物制品检测技术领域，具体涉及乙型肝炎病毒前S1抗原特异性单链抗体及其应用。

背景技术

乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）引起的急、慢性肝炎给人类健康带来了严重的威胁，目前全球范围内约有4亿人感染 HBV，每年约有100万人死于HBV感染相关的疾病。

乙型肝炎病毒前S1抗原（HBV preS1，preS1）是乙肝病毒大蛋白（HBV largesurface protein，LHB）N末端特有的一段结构域。LHB本身存在于感染性病毒颗粒表面，因此，preS1的水平能反映患者体内感染性病毒颗粒的数量，比乙肝表面抗原（HBsAg）能更好地反映HBV的传染性。流行病学调查表明preS1阳性患者比单纯的HBsAg阳性者有更强的传染性，这使得preS1被作为一种直观的HBV传染性评价指标，在乙肝的防控方面具有较大的意义。定量分析HBV感染者血清中LHB水平与HBV DNA的关系，发现LHB水平随着HBV DNA水平变化而变化，二者之间存在很高的相关性，表明血清 LHBs水平可以反映HBV感染者循环系统中的病毒载量。当HBV基因前C区发生突变或者经抗病毒治疗后HBeAg转阴时，会导致HBeAg检测阴性，此时preS1检测可以更准确地反映病毒在体内是否继续复制。HBV preS1常在病毒感染早期出现，1个月左右消失，preS1转阴的时间越早，提示急性肝炎的病程越短，预后越好；若preS1持续存在则预示急性乙型肝炎在向慢性乙型肝炎转变。preS1阳性提示HBV复制活跃，传染性强；preS1阴性可作为HBV被清除和感染趋于恢复病情趋向好转的标志。针对HBV感染者血清中preS1含量的连续监测和动态观察，可以更好地评估患者体内HBV复制状态、抗病毒疗效和患者的预后。

HBV preS1是形成完整HBV病毒颗粒所必需的，其103-119位氨基酸和紧随其后的preS2 的第1-5 位氨基酸对于 HBV 颗粒的形成至关重要。HBV preS1 介导了HBV结合肝细胞表面受体的功能，目前公认preS1(aa21-47)肽段是HBV进入肝细胞必不可少的，而preS1(aa29-34)－QLDPAF motif是肝细胞受体结合区域。在长度仅百余个氨基酸残基的 preS1区域内，有数十个T细胞表位和 B 细胞表位。HBV preS1中的线性B细胞表位主要位于其N端和C端，即preS1(aa21-59)和preS1(aa71-119)，并且有文献报道在preS1(aa34-59)片段内存在构象性B细胞表位，具有很强的免疫原性，能诱发机体产生保护性的抗体，针对preS1(aa37-45)的保护性抗体对黑猩猩HBV感染有很好的预防作用，并证实作用于preS1(aa37-45)的抗体具有良好的体内中和HBV作用。

鼠源性单克隆抗体存在制备成本较高、周期较长、存在一定程度的产品批间差异和应用于人体的异源性的问题。通过建立全人源抗体库，淘选针对preS1表位肽特异性的全人源抗体，可以有效克服传统鼠源性单克隆抗体的上述问题，更加经济地建立HBV preS1免疫检测试剂盒，制备更加适用的HBV感染预防性产品，为HBV感染的诊断和预防提供重要的新手段和新工具。

因此，开发能够更有效地结合HBV preS1的HBV preS1特异性全人源单链抗体具有重要的实际意义。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有产品存在的上述不足，提供一种HBV preS1特异性单链抗体及其应用。