[发明专利]一种突变体斑马鱼在制备骨髓增生异常综合征的动物模型中的应用

权利要求书

1.一种突变体斑马鱼在制备骨髓增生异常综合征的动物模型中的应用，其特征在于：所述突变体斑马鱼为asxl1突变体斑马鱼；

所述的asxl1突变体斑马鱼为斑马鱼asxl1基因第12个外显子中第817位至823位缺失7个碱基或第798位至819位缺失22个碱基的斑马鱼；

所述的骨髓增生异常综合征为骨髓增生异常综合征伴粒系病态造血，其症状为中性粒细胞发育异常，进而导致中性粒细胞减少。

2.根据权利要求1所述的突变体斑马鱼在制备骨髓增生异常综合征的动物模型中的应用，其特征在于：所述的骨髓增生异常综合征是由asxl1基因的异常表达引起。

3.根据权利要求1所述的突变体斑马鱼在制备骨髓增生异常综合征的动物模型中的应用，其特征在于，包括如下步骤，所述的asxl1突变体斑马鱼通过如下方法制备得到：

将gRNA和Cas9 mRNA混合均匀，然后共同注射到野生斑马鱼胚胎中，再将获得的胚胎进行培养，得到asxl1基因缺失斑马鱼突变体；

所述的gRNA通过如下方法制备得到：以含有gRNA骨架序列的质粒为模板进行PCR扩增，得到模板DNA；然后利用T7 RNA聚合酶体外转录合成gRNA；其中，PCR扩增引物为：

FP:5’-GAAATTAATACGACTCACTATAGGGTGTGGATGTCATCAGGACATGTTTTAGAGCTAGAAATAGC-3’；

RP:5’-AGCACCGACTCGGTGCCACT-3’。