[发明专利]一种产甲酸草酸杆菌及其应用

说明书

本发明公开了一种产甲酸草酸杆菌(Oxalobacter formigenes)及其应用。所述产甲酸草酸杆菌的保藏编号为CCTCC M 2016183。本发明的产草酸甲酸杆菌对草酸具有降解作用，可以降低人和动物血液及尿液的草酸及草酸盐浓度，且能够有效降低草酸钙结晶；使用该菌制成的菌剂可长期保存其活性。

技术领域

本发明涉及微生物领域，具体涉及一种产甲酸草酸杆菌(Oxalobacterformigenes)及其应用。

背景技术

草酸钙结石是最常见的肾结石类型，占所有结石种类的70-80％，且治疗后容易反复发作。尿液中草酸排泄过多是草酸钙结石形成的重要病理因素。内源性代谢产物和外源性的草酸摄入增多均可造成高草酸尿症，已证实46％的特发性草酸钙结石患者存在肠道草酸吸收增加。而遗传性高草酸尿症患者至今仍缺乏有效的治疗药物，平均37岁即发展至终末期肾衰竭。因此，增加肠道中草酸降解和排泄可能是预防和治疗草酸钙结石的有效方法之一。

产甲酸草酸杆菌是一种能分解人和动物肠道内草酸并以其为唯一碳源和能源的革兰氏阴性厌氧菌。Hatch等研究证实产甲酸草酸杆菌能够通过增加原发性高草酸尿症I型小鼠结肠草酸主动分泌来增加粪便草酸排泄，从而使尿液中草酸排泄量恢复正常。提示产甲酸草酸杆菌不仅能够降解外源性摄入的草酸，还能够通过促进肠道主动分泌内源性草酸代谢物进一步增加肠道草酸排泄。在特发性草酸钙结石患者中进行的临床研究显示产甲酸草酸杆菌菌落数与草酸钙结石复发呈显著负相关，可减少70％的结石复发风险。Siener通过评价在标准化饮食条件下特发性草酸钙结石患者产甲酸草酸杆菌与肠道、血浆和尿液草酸水平的关系，发现在产甲酸草酸杆菌阳性的患者中，尿液草酸排泄量显著低于阴性患者，并且血浆草酸水平比阴性患者低三倍。

现有技术中虽然有涉及产甲酸草酸杆菌的专利申请(CN 104998253A，已被驳回)，然而其中并没有具体披露该菌株的名称，也没有证明使用该菌株能够降低草酸盐浓度的效果数据。目前现有技术中产甲酸草酸杆菌的标准菌株为DSM 4420(购自德国微生物菌种保藏中心)，但该菌株长期保存后的活性以及用于降低草酸盐的效果并不理想。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对现有技术中的产甲酸草酸杆菌降解草酸的能力低的不足，提供一种产甲酸草酸杆菌及其应用。本发明的产草酸甲酸杆菌对草酸具有降解作用，可以降低人和动物血液及尿液的草酸及草酸盐浓度，且能够有效降低草酸钙结晶；使用该菌制成的菌剂可长期保存其活性。

本发明主要通过以下技术方案解决上述技术问题：

本发明提供一种产甲酸草酸杆菌(Oxalobacter formigenes)，其保藏编号为CCTCC M 2016183。

本发明还提供一种制备产甲酸草酸杆菌CCTCC M 2016183的方法，所述的方法包括以下步骤：将所述的产甲酸草酸杆菌CCTCC M 2016183接种于培养基中培养，得发酵液。

所述的培养基可为本领域常规，例如ATCC的推荐的培养基；本发明人付出创造性劳动后对培养基的组分及其含量进行了摸索，意外发现组分及其含量具体如下的培养基能够大幅提高产甲酸草酸杆菌CCTCC M 2016183的生物量，故本发明所述的培养基较佳地包括下述组分：磷酸二氢钾0.4～0.6g/L、磷酸氢二钾0.4～0.6g/L、醋酸钠0.6～1g/L、硫酸铵0.4～0.6g/L、草酸钠6～8g/L以及酵母粉1～3g/L、七水硫酸镁0.015～0.035g/L、蛋白胨0.5～1.5g/L、刃天青0.001～0.003g/L、碳酸钠3～5g/L、半胱氨酸盐酸盐0.4～0.6g/L；在本发明一较佳实施例中，所述的培养基包括下述组分：磷酸二氢钾0.5g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、醋酸钠0.82g/L、硫酸铵0.5g/L、草酸钠7.0g/L以及酵母粉2.0g/L、七水硫酸镁0.025g/L、蛋白胨1.0g/L、刃天青0.001g/L、碳酸钠4.0g/L以及半胱氨酸盐酸盐0.5g/L。