[发明专利]一种肠衣肝素钠联合提取工艺

权利要求书

1.一种肠衣肝素钠联合提取工艺，其特征在于：包括如下步骤：

①将收集到的肠粘膜调节至PH值为9.0-10.0，再加入猪胰腺在50-55℃条件下酶解得到酶解液；

②将酶解液冷却至室温后，控制升温至50-55℃，加入树脂并不断搅拌以吸附料液中的肝素钠成分，肠膜蛋白则在溶液中，过滤得到的吸附有肝素钠成分的树脂和过滤液，后静置过滤；

③树脂过滤得到的滤液，调节PH至9.0-10.0，温度为50-55℃，加入猪胰腺继续酶解得到酶解液，然后经过膜浓缩后得到浓缩液，浓缩液经过喷雾干燥得到肠膜蛋白；

③过滤得到的吸附有肝素钠成分的树脂用清水充分漂洗，调节PH为9.0-10.0，再进行2次洗脱后将两次洗脱液合并，将上述所得的洗脱液调节到PH＝9.5，搅拌、静置后析出上层清液，合并清液和滤液，精细调节PH＝6.0，加入乙醇沉淀过夜，上层乙醇清液回收利用，收集下部沉淀物，经真空烘干，得肝素钠粗品；

④将所得肝素钠粗品经过盐溶和乙醇沉淀后得到的沉淀物再次洗脱后，最后经过真空干燥，即得到肝素钠精品。

2.根据权利要求1所述的一种肠衣肝素钠联合提取工艺，其特征在于：上述步骤①酶解的时间为30min。

3.根据权利要求1所述的一种肠衣肝素钠联合提取工艺，其特征在于：上述步骤②中树脂的用量为酶解液的3％。

4.根据权利要求1所述的一种肠衣肝素钠联合提取工艺，其特征在于：上述步骤③中吸附有肝素钠成分的树脂用清水充分漂洗后，用1.2mol/L氯化钠溶对溶液进行洗脱2次，第一次洗脱液为树脂体积的1.5倍，洗脱5h，第二次洗脱为树脂体积的0.8倍，洗脱时间为2h，洗脱液合并；将上述所得的洗脱液调节到PH＝9.5，搅拌30min后，静置12h，然后仔细的析出上层清液，合并清液和滤液，精细调节PH＝6.0，加入1.5倍量的95％乙醇沉淀过夜，上层乙醇清液回收利用，收集下部沉淀物，经真空烘干，得肝素钠粗品。

5.根据权利要求1所述的一种肠衣肝素钠联合提取工艺，其特征在于：上述步骤④的具体操作步骤是：将所得肝素钠粗品用2％的氯化钠溶液完全溶解，制成浓度为6％的溶液；当滤液温度下降至36℃时，用饱和的氢氧化钠溶液调节PH＝10.5，料液用“除菌过滤器”过滤后，滤液用盐酸调节至PH＝6.0，加入1倍量的95％乙醇，于8℃条件下沉淀处理24h，收集沉淀物用10％氯化钠溶液溶解后，再加上3倍的95％乙醇进行沉淀，收集沉淀物收集沉淀物再用95％乙醇洗脱一次，真空干燥得肝素钠精品。