[发明专利]复合脱毛酶制剂的制备方法及其在含小毛进口黄牛皮脱毛中的应用

权利要求书

1.复合脱毛酶制剂的制备方法，其特征在于包括如下工艺步骤：

A、发酵

将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CGMCC No.14836按照质量比为2％-4％的接种量接种于含10μg/ml Cm，装液量为2.5L-3.5L的2YT发酵培养基中，在温度为35-37℃、转速为180-200转/分钟的条件下发酵，当OD₆₀₀值为0.5-1时加入0.5‰-1‰的诱导剂IPTG，转速调至250-300转/分钟的条件下培养40-44小时后终止发酵制成含有脱毛酶的发酵液；

B、脱毛酶制剂JW-3-1的制备

将步骤A中制成的含有脱毛酶的发酵液离心收集上清液，制成脱毛酶制剂JW-3-1；

C、复合脱毛酶制剂的制备

按照脱毛酶制剂JW-3-1：中温α-淀粉酶：胰酶：脂肪酶：纤维素酶：弹性蛋白酶的质量份数比＝15-35：10-30：10-20：10-25：5-10：5-10的比例复配均匀，其中每份为10000U的酶活，制成复合脱毛酶制剂；脱毛酶制剂JW-3-1、中温α-淀粉酶、胰酶、脂肪酶、纤维素酶、弹性蛋白酶的适宜作用条件为：温度30-36℃，pH＝6-7。

2.根据权利要求1所述的复合脱毛酶制剂的制备方法，其特征在于所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CGMCC No.14836接入发酵培养基之前进行扩大培养。

3.根据权利要求2所述的复合脱毛酶制剂的制备方法，其特征在于所述的扩大培养包括菌种活化、摇瓶菌种的制备。

4.根据权利要求3所述的复合脱毛酶制剂的制备方法，其特征在于所述的菌种活化是将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CGMCC No.14836按2％-4％接种量接种于含10μg/mlCm的5mlLB液体培养基中，在温度为35-37℃、转速为160-180转/分钟的条件下培养6-10小时。

5.根据权利要求3或4中任一项所述的复合脱毛酶制剂的制备方法，其特征在于所述的摇瓶菌种的制备是将活化后的菌种接种于含10μg/ml Cm的50-100ml2YT培养基中，在温度为35-37℃、转速为160-180转/分钟的条件下培养8-12小时。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的复合脱毛酶制剂在含小毛进口黄牛皮脱毛中的应用。

7.根据权利要求6所述的复合脱毛酶制剂在含小毛进口黄牛皮脱毛中的应用，其特征在于包括如下工艺步骤：

a、干皮浸水

将含小毛进口黄牛皮干皮洗净，除去毛皮中杂物，加0.2％-0.4％的浸水酶，pH＝8-10，室温浸泡至皮块成鲜皮状；

b、去肉

将步骤a所制备的浸水后的牛皮去除肉面脂肪；

c、除脂

在步骤b中去除肉面脂肪的皮块中加入其质量100％-300％的水，在其中加1％的脱脂剂，室温下处理2-3小时除脂；

d、有温有浴转鼓酶脱毛

将步骤c所制备的除脂后的皮块在固液比＝1:1-3、温度为30℃-36℃的条件下进行，复合脱毛酶制剂用量为每千克含小毛进口黄牛皮中加入按照脱毛酶制剂JW-3-1：中温α-淀粉酶：胰酶：脂肪酶：纤维素酶：弹性蛋白酶的质量份数比＝15-35：10-30：10-20：10-25：5-10：5-10的比例制备的复合脱毛酶制剂，其中每份为10000U的酶活，转速5-6转/分钟的条件下转鼓脱毛2-5小时。