[发明专利]一种透明质酸钠及其发酵方法在审
| 申请号： | 201811486580.4 | 申请日： | 2018-12-06 |
| 公开（公告）号： | CN109486879A | 公开（公告）日： | 2019-03-19 |
| 发明（设计）人： | 何文汇;金修建;杨永超 | 申请（专利权）人： | 上海景峰制药有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/26 | 分类号： | C12P19/26;C12R1/46 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 李佳 |
| 地址： | 201900*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 透明质酸钠 发酵 活化 菌种 发酵培养基 平板培养基 发酵培养 高分子量 接种量 通气量 制备 接种 应用 | ||
1.一种透明质酸钠的发酵方法，其特征在于，包括如下步骤：
(A)将菌种在平板培养基上培养活化12-24h；
(B)将活化后的菌种按照5-15wt％接种量接种在发酵培养基上，通气量控制在1-2vvm之间，发酵培养24h以上，即可；
其中，所述发酵培养基中分阶段添加葡萄糖，葡萄糖每间隔2-3h添加2-3kg。
2.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，所述步骤(A)中，平板培养基的组成为：脑心浸粉30-40g/L，酵母浸粉5-15g/L，葡萄糖0.5-2.0g/L，琼脂10-15g/L。
3.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，所述步骤(A)中，平板培养基上的培养温度控制在37-39℃之间。
4.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，所述步骤(B)中，所述发酵培养基每400L包含的组成为：葡萄糖13-16kg，酵母浸粉6-9kg，硫酸镁0.6-1.3kg，磷酸二氢钠1.0-1.3kg，硫酸钾0.3-0.6kg，L-精氨酸16-23g，微量元素溶液0.9-1.3L，消泡剂15-23ml。
5.根据权利要求4所述的发酵方法，其特征在于，所述步骤(B)中，发酵培养基的pH控制在6-14之间，温度为37-39℃之间，转速在60rpm以上。
6.根据权利要求4所述的发酵方法，其特征在于，所述步骤(A)中，所述发酵培养基中补充的氢氧化钠与葡萄糖的质量比为(1.2-1.5)：1。
7.根据权利要求4所述的发酵方法，其特征在于，所述步骤(A)中，氢氧化钠配成浓度为3-5mol/L的氢氧化钠溶液，更优地浓度为4mol/L。
8.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，所述步骤(A)与所述步骤(B)之间，还包括扩大培养的步骤：将活化后的菌种在摇瓶中培养后，再在种子培养基上继续扩大培养。
9.根据权利要求8所述的发酵方法，其特征在于，所述步骤(A)中，摇瓶中的培养基每3.5L包含的组成为：葡萄糖55-70g，硫酸镁4.5-7.3g，酵母浸粉43-63g，磷酸二氢钾4.6-6.7g，碳酸氢钠0.20-0.31g，磷酸盐缓冲液115-123ml，微量元素溶液2.4-3.3ml，消泡剂0.7-1.4ml；
优选地，所述种子培养基每25L包含的组成为：葡萄糖434-477g，硫酸镁42-49g，酵母浸粉431-485g，磷酸二氢钾41-47g，碳酸氢钠2.0-2.9g，磷酸盐缓冲液910-930ml，微量元素溶液17-30ml，消泡剂0.8-1.2ml。
10.权利要求1-9任一项所述的发酵方法发酵得到的透明质酸钠；
优选地，所述透明质酸钠的产量为11g/L以上，分子量为130-200Mw之间。
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