[发明专利]一种基于液体发酵的冬虫夏草多糖提取纯化工艺在审
申请号: | 201811487214.0 | 申请日: | 2018-12-06 |
公开(公告)号: | CN109402194A | 公开(公告)日: | 2019-03-01 |
发明(设计)人: | 褚铭南 | 申请(专利权)人: | 桐乡市博奥生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P19/04 | 分类号: | C12P19/04;C08B37/00;C12R1/645 |
代理公司: | 嘉兴启帆专利代理事务所(普通合伙) 33253 | 代理人: | 廖银洪 |
地址: | 314000 浙江省嘉兴市桐*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 冬虫夏草多糖 液体发酵 提取纯化 冬虫夏草菌丝体发酵液 大孔吸附树脂柱 冬虫夏草 多糖浓缩液 提取物 洗脱液 种子液 冬虫夏草菌 混合液提取 操作过程 离心沉淀 连续处理 浓缩干燥 提取效率 种子培养 脱色 混合液 烘干 产率 洗脱 浓缩 | ||
一种基于液体发酵的冬虫夏草多糖提取纯化工艺,包括如下步骤:A、冬虫夏草菌种子培养得到种子液;B、种子液经液体发酵得到冬虫夏草菌丝体发酵液;C、冬虫夏草菌丝体发酵液粉碎8‑15min得到冬虫夏草混合液;D、冬虫夏草混合液提取浓缩得到多糖浓缩液;E、多糖浓缩液离心沉淀烘干得到冬虫夏草多糖提取物;F、冬虫夏草多糖提取物上AB‑8型大孔吸附树脂柱,洗脱,并收集洗脱液;G、洗脱液,上D‑280大孔吸附树脂柱,脱色浓缩干燥得到冬虫夏草多糖。本发明的基于液体发酵的冬虫夏草多糖提取纯化工艺,实现了培养、提取、纯化连续处理,提取效率高,冬虫夏草多糖产率高、纯度高,操作过程较简单,成本较低。
技术领域
本发明涉及微生物培养和天然产物提取技术领域,具体涉及一种基于液体发酵的冬虫夏草多糖提取纯化工艺。
背景技术
虫草多糖,或称多糖,作为冬虫夏草的主要活性成分之一,是冬虫夏草中含量最高的药理活性物质,含量可以达到10%,是一种很有价值的潜在新型药食两用资源。虫草多糖是由甘露糖、虫草素、腺苷、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖、岩藻糖等组成的多聚糖。它的抗癌活性和免疫活性引起人们的极大兴趣,另外冬虫夏草还用于治肺结核、气短喘咳、阳痿、梦遗、自汗盗汗、腰膝酸痛等。
目前在工业生产中虫草多糖主要从蛹虫草子实体中提取。但是由于虫草子实体的生产成本高,从而导致虫草多糖的生产成本极高。
目前用虫草多糖的提取方法主要有热水浸提法、酸浸提法、碱浸提法、超声波提取法、微波提取法等。
此外,利用人工发酵冬虫夏草菌来获得与天然冬虫夏草化学组成成分以及药理作用基本相同的菌丝体,成为当下解决虫草资源短缺的一种最可行的方法。
但是,现有的冬虫夏草多糖提取工艺,不能实现培养提取纯化连续处理,提取效率低,冬虫夏草多糖产率低,操作过程复杂,成本较高,且不能将多糖进一步分离纯化,无法得到纯度较高的多糖组分,使冬虫夏草多糖产品的开发利用收到限制。
基于上述情况,本发明提出了一种基于液体发酵的冬虫夏草多糖提取纯化工艺可有效解决以上问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种基于液体发酵的冬虫夏草多糖提取纯化工艺。本发明的基于液体发酵的冬虫夏草多糖提取纯化工艺,实现了培养、提取、纯化连续处理,提取效率高,冬虫夏草多糖产率高、纯度高,操作过程较简单,成本较低;且能将多糖进一步分离纯化,得到纯度较高的多糖组分,有利于冬虫夏草多糖产品的开发利用。
本发明通过下述技术方案实现:
一种基于液体发酵的冬虫夏草多糖提取纯化工艺,包括如下步骤:
A、将冬虫夏草菌接种到冬虫夏草种子培养基上,放进摇床培养箱,培养3-4d,得到种子液;
B、将步骤A得到的种子液,接种到经灭菌处理的冬虫夏草液体培养基上,接种量为6-9%,放进恒温恒湿培养箱中,在28.5℃温度条件下,发酵5-8天,得到冬虫夏草菌丝体发酵液;
C、将步骤B得到的冬虫夏草菌丝体发酵液放入破壁机中,加入2-4倍质量的蒸馏水,粉碎8-15min,得到冬虫夏草混合液;
D、将步骤C得到的冬虫夏草混合液,超声波处理40-50min,在70-75℃下回流提取4-5h,提取液过滤后浓缩,得到多糖浓缩液;
E、在步骤D得到的多糖浓缩液中加入3-4.5倍体积的无水乙醇,搅拌后冷却至4℃,静置18-30小时,进行离心处理,并将沉淀烘干得到冬虫夏草多糖提取物;
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