[发明专利]一种高密度脂蛋白胆固醇的检测方法及检测试剂盒

说明书

本发明适用于生物检测技术领域，提供了一种高密度脂蛋白胆固醇的检测方法及检测试剂盒，检测方法采用速率测定法，设置主波长500～546nm，在主波长500～546nm处，反应体系中吸光度的的升高速率与样本中高密度脂蛋白胆固醇的活性成正比，延迟60～90s，然后测定60～150s的吸光度升高速率，得到高密度脂蛋白胆固醇的浓度。检测试剂盒包括酶试剂1和酶试剂2，酶试剂1与酶试剂2的体积比为2.8～3.3:1。借此，本发明能够排除血清本底的干扰，提高检测准确度，同时缩短反应时间，提高反应效率。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种高密度脂蛋白胆固醇的检测方法及检测试剂盒。

背景技术

高密度脂蛋白胆固醇(以下简称HDL-C)是指高密度脂蛋白分子所携的胆固醇，是逆向转运的内源性胆固醇酯，将其运入肝脏，再清除出血液。因此，HDL-C能够抗动脉粥样硬化，可减少患冠状动脉心脏病的危险。

现有技术中，HDL-C的测定方法主要包括免疫分离法、多聚阴离子遮蔽法和酶修饰法等，这些方法均采用终点法测定，终点法测定易受血清本底干扰，而且反应时间长，至少需要5min，大大影响了结果的准确性和测定效率。

综上可知，现有技术在实际应用中显然存在不足之处，有必要加以改进。

发明内容

针对上述技术缺陷，本发明的目的在于提供一种高密度脂蛋白胆固醇的检测方法及检测试剂盒，其采用速率测定法，能够排除血清本底的干扰，提高检测准确度，同时缩短反应时间，提高反应效率。

为了实现上述目的，本发明提供一种高密度脂蛋白胆固醇的检测方法，所述检测方法采用速率测定法，设置主波长500～546nm，在主波长500～546nm处，反应体系中吸光度的的升高速率与样本中高密度脂蛋白胆固醇的活性成正比，延迟60～90s，然后测定60～150s的吸光度升高速率，得到高密度脂蛋白胆固醇的浓度；

检测步骤如下：

A取空白管、标准管及样本管，三种管中都分别加入酶试剂1，然后在空白管、标准管及样本管内对应加入相同体积的蒸馏水、标准液及样本，混匀后孵育3～5min；再向三种管中都分别加入酶试剂2，混匀，得到反应液；

B所述反应液延迟60～90s后，在主波长500～546nm处读取吸光度，反应60s后再读取吸光度，计算平均吸光度变化率，得到空白管、标准管及样本管内反应液的每分钟吸光度变化率；

C计算高密度脂蛋白胆固醇的浓度。

根据本发明的一种高密度脂蛋白胆固醇的检测方法，所述酶试剂1包括胆固醇氧化酶和过氧化物酶，所述胆固醇氧化酶的酶活力为1.4～1.8KU/L，所述过氧化物酶的酶活力为1.8～2.2KU/L。

根据本发明的一种高密度脂蛋白胆固醇的检测方法，所述酶试剂2包括胆固醇脂酶，所述胆固醇脂酶的酶活力为1.8～2.2KU/L。

根据本发明的一种高密度脂蛋白胆固醇的检测方法，所述酶试剂1与所述酶试剂2的体积比为2.8～3.3:1。

根据本发明的一种高密度脂蛋白胆固醇的检测方法，所述酶试剂1和酶试剂2的总体积与所述样本的体积比为100～120：1。

根据本发明的一种高密度脂蛋白胆固醇的检测方法，所述检测方法还设置副波长700～800nm。

根据本发明的一种高密度脂蛋白胆固醇的检测方法，所述标准液的浓度为2～4mmol/L。

根据本发明的一种高密度脂蛋白胆固醇的检测方法，本发明还提供一种用于所述检测方法的检测试剂盒。

根据本发明的一种检测试剂盒，所述检测试剂盒包括酶试剂1和酶试剂2，所述酶试剂1与所述酶试剂2的体积比为2.8～3.3:1。