[发明专利]一种炭疽菌产孢用液体发酵培养基

说明书

本发明提供了一种适宜于炭疽菌液体发酵培养的优良培养基，配制1000ml该培养基的配方如下：荠菜20g‑40g，大豆粉3g‑6g、蔗糖2g‑4g、磷酸二氢钾0.5g，蒸馏水加至1000ml，调节pH为6.5。采用该培养基能够快速高效的得到大量炭疽菌分生孢子。本发明通过将杂草作为培养基主要成分，降低了炭疽菌发酵培养成本，获得了高效产孢用炭疽菌培养基。

技术领域

本发明属于微生物培养技术领域，具体涉及一种炭疽菌产孢用液体发酵培养基。

背景技术

植物炭疽病是我国作物、果蔬及观赏植物等普遍发生的一类病害，主要由炭疽菌属病原菌导致。炭疽菌分类归为子囊菌门、粪壳菌纲、肉座菌亚纲目小丛壳科、小丛壳属。炭疽菌属真菌在我国分布广泛，从东北到海南省均有分布，多种植物可以作为其寄主，具有广泛寄生性。该菌常为害植物叶、花、果、茎及嫩枝，引发各种农作物的炭疽病，造成叶斑、叶枯、花腐、果腐和枝枯等症状，影响植物的生长发育，降低作物品质，严重时可造成落花、落果，甚至植株死亡，导致农作物减产。

炭疽菌作为一种重要微生物资源也被广泛利用。例如，炭疽菌也是重要的植物内生真菌，普遍存在于各种植物中，广泛分布于植物的根、茎、叶、花、果实及及种子等各个器官组织内，可增强植物对病虫害的抗能力或产生特有的次生代谢产物，因而可以作为资源微生物开发利用；另一方面，炭疽菌属真菌也是植物病原菌生物防治领域一个重要菌种来源，例如我国早期利用炭疽菌“鲁保一号”生物防治大豆菟丝子。因此开发可用于该菌生产培养的广适型、低成本培养基显得至关重要。

我国杂草种类多样，生物质资源丰富，但是在经过了初期的化学防控之后剩余的杂草多被浪费在田间地头，或非耕地杂生的草资源被严重浪费，基本得不到利用，这对于含有大量生物质资源的杂草群体来说，无疑是巨大的浪费。目前，对于真菌液体发酵培养基原料的研究主要以粮食作物，例如小麦、玉米、大豆和马铃薯等为应用原料，或以化学试剂为主要原料，例如葡萄糖、蛋白胨和酵母浸粉等。截至目前为止，对以田间杂草为原料的发酵培养基研究则少之又少。因此，研究以杂草为基础的微生物发酵培养基，最大化的开发杂草资源，较少浪费，对于优化微生物培养基组成，降低配制成本都有重要的意义。

发明内容

针对现有技术上的不足，本发明提供了一种适宜于炭疽菌液体发酵培养的优良培养基，采用该培养基能够快速高效的得到大量炭疽菌分生孢子。本发明通过将杂草作为培养基主要成分，降低了炭疽菌发酵培养成本，获得了高效产孢用炭疽菌培养基。

本发明是通过以下措施实现的：

本发明提供一种含有荠菜的炭疽菌产孢用液体发酵培养基，配制1000ml该培养基的配方如下：荠菜20g-40g，大豆粉3g-6g、蔗糖2g-4g、磷酸二氢钾0.5g，蒸馏水加至1000ml，调节pH为6.5。

优选的，所述组分中荠菜20g、大豆粉3g、蔗糖2g。

优选的，所述组分中荠菜20g、大豆粉6g、蔗糖4g。

优选的，所述组分中荠菜40g、大豆粉6g、蔗糖2g。

本发明还提供了含有荠菜的炭疽菌产孢用液体发酵培养基的制备方法：以田间或人工种植的荠菜为原料，将荠菜去除根部洗净，加入蒸馏水，煮沸30-35分钟，收集过滤后所获得汁液；在汁液中加入大豆粉、蔗糖和磷酸二氢钾；加蒸馏水，调节pH，定容；将定容后的溶液于121℃，1.05×10⁵Pa下灭菌锅灭菌20分钟，灭菌后备用。

含有荠菜的炭疽菌产孢用液体发酵培养基的应用：将培养基倒入培养瓶，培养温度为25±3℃，通过液体摇瓶小量培养法培养3-5天。

所述炭疽菌产孢用液体发酵培养基适用于炭疽菌菌株的产孢培养。