[发明专利]一种葡萄酒中甜菊糖苷的检测方法

说明书

本发明涉及一种葡萄酒中甜菊糖苷的检测方法，包括：1)量取8‑12ml葡萄酒试样于离心管中，加入25‑35ml的提取液，经旋涡振荡、超声提取、过滤后，备用：2)将过滤后的提取液以1‑3ml/min的速度连续上样到硅胶固相萃取小柱，并用氮气吹干，使得葡萄酒试样在硅胶固相萃取小柱上富集；3)用洗脱液洗脱富集后的硅胶固相萃取小柱，收集洗脱后的洗脱液，干燥浓缩后，用第一溶液定容得到样品液，过滤后，将样品液上样到高效液相色谱仪，用以检测样品液中甜菊糖苷含量；本发明通过提取、洗脱、检测，可以快速的检测出葡萄酒中甜菊糖苷含量，显著缩短了检测时间，不受基质中多组分干扰、操作简单、检测结果准确，适合葡萄酒中甜菊糖苷的快速检测。

技术领域

本发明涉及食品添加剂检测领域，特别涉及一种葡萄酒中甜菊糖苷的检测方法。

背景技术

甜菊糖苷是从菊科草本植物甜叶菊的叶子中提取出来的一类含8中成分的双萜糖苷的混合物，也称为甜菊糖、甜菊苷，甜菊糖苷除了具有高甜度、低热值这些基本特性外，还具有许多功能活性，如将血糖、将血压、抗肿瘤、止泻等，这种新型的甜味剂广泛用于食品、饮料、医药、日化工业等不同领域。虽然甜菊糖苷具有众多优点，但它也备受争议，近年来有报道称其有致癌性，但众多试验证明甜菊糖苷在合理使用的情况下其安全性还是很高的。

葡萄酒被称为是“整个世界历史长河中，未曾间断使用的最古老饮料和最主要的药物”。对于女性来说，红酒有滋补、助消化、美容抗衰老等作用，主要是因为葡萄酒在发酵过程中生成了很多抗氧化物质，如多酚类物质以及维生素等。人们消费观念在改变，正朝着低度化健康化发展，而葡萄酒度数低，有软化脑细血管和美容等作用能够满足消费者的对健康的要求，加之葡萄酒知识的普及以及新媒体的推波助澜，未来中国葡萄酒消费必将会高速增长，葡萄酒在中国的发展很有潜力，但葡萄酒中添加有甜味剂，如甜味糖苷，如果含量超标，对人体健康有潜在的威胁，因此，需要检测葡萄酒中添加剂的含量，现有技术检测方法有分光光度法、毛细管电泳法、气相色谱法等，这些方法由于受基质中多组分干扰，误差较大，且前处理方法繁琐、效率低，不能快速的检测葡萄酒中甜菊糖苷的含量。

发明内容

本发明针对现有技术问题，提供一种葡萄酒中甜菊糖苷的检测方法，本发明通过提取、洗脱、检测，可以快速的检测出葡萄酒中甜菊糖苷含量，显著缩短了检测时间，不受基质中多组分干扰、操作简单、检测结果准确，适合葡萄酒中甜菊糖苷的快速检测。

为实现以上目的，本发明采用的技术方案为一种葡萄酒中甜菊糖苷的检测方法，包括以下步骤：

1)量取8-12ml葡萄酒试样于离心管中，加入25-35ml的提取液，经旋涡振荡、超声提取、过滤后，备用：

2)将步骤1)过滤后的提取液以1-3ml/min的速度连续上样到硅胶固相萃取小柱，并用氮气吹干，使得葡萄酒试样在硅胶固相萃取小柱上富集；

3)用洗脱液洗脱步骤2)富集后的硅胶固相萃取小柱，收集洗脱后的洗脱液，干燥浓缩后，用第一溶液定容得到样品液，过滤后，将样品液上样到高效液相色谱仪，用以检测样品液中甜菊糖苷含量。

所述高效液相色谱仪分析条件为：

色谱柱为Waters RP C₁₈色谱柱；

色谱柱温度30℃；

流动相：乙腈和去离子水，乙腈体积30％，去离子水体积70％；

流速1.0ml/min；

进样体积10μL。

所述提取液为乙腈和去离子水的混合液，所述乙腈和去离子水的体积比为2:3。

所述洗脱液为二氯甲烷、甲醇和去离子水的混合液，所述二氯甲烷、甲醇和去离子水的体积比为2:7:1。

所述干燥浓缩是将洗脱液于50-55℃水浴中用氮气吹至近干。