[发明专利]一种优化苏格木勒-4汤中黄酮含量的方法在审
申请号: | 201811493932.9 | 申请日: | 2018-12-07 |
公开(公告)号: | CN110118736A | 公开(公告)日: | 2019-08-13 |
发明(设计)人: | 靳尚武;孙利东;白东浩;查干夫;孟根花;果佳瀮 | 申请(专利权)人: | 鄂尔多斯市疾病预防控制中心(鄂尔多斯市地方病防治所鄂尔多斯市结核病防治所鄂尔多斯市职业病防治所) |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 017000 内蒙古自治区鄂尔*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 黄酮 苏格木勒 正交设计 料液比 优化 优化提取条件 最佳工艺条件 单因素实验 芦丁对照品 蒙药 标准曲线 工艺验证 实验因素 水浴加热 响应面法 最大波长 单因素 回流法 响应面 液料比 正交法 比对 得率 液料 制备 考察 配制 绘制 | ||
1.一种优化苏格木勒-4汤中黄酮含量的方法,其特征在于:该方法包括如下步骤:
(1)、首先将酸枣仁、白豆蔻、白苣胜和荜拨药材分别粉碎成粉末,分别称取酸枣仁、白豆蔻、白苣胜和荜拨药材粉末1.5g、1.5g、1.0g、0.5g置于同一圆底烧瓶内,加入相应倍数的水振摇混匀、浸泡,将圆底烧瓶放入水浴加热回流装置的水浴锅中加热至规定温度,并在规定时间内保持规定温度,接收样品溶液:苏格木勒-4汤,备用。
(2)、配制芦丁对照品溶液
用分析天平精确称取芦丁标准品10mg,置于100ml容量瓶中,用无水乙醇溶解并且定容,备用。
(3)、选取最大波长
移取芦丁对照品溶液和样品溶液各4ml放入同一25ml容量瓶,加入质量分数为5%的NaNO2溶液1ml,混匀后放置6分钟,加入质量分数为10%的Al(NO3)3溶液1ml,混匀后放置6分钟,加入质量分数为4%的NaOH溶液10ml,然后加入超纯水稀释至刻度,混匀后放置15分钟,置于可见光分光光度计进行200~800纳米全波长扫描;另外取相应体积的显色溶液,加入超纯水定容至刻度,作为空白溶液;记录测量图谱,以确定最大吸收波长;
(4)、绘制标准曲线
精密移取芦丁对照品溶液0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、12.0ml,将其分别置于25ml容量瓶中,按照NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色方法显色,备用;用可见光分光光度计在最大吸收波长处进行吸光度测量,对照品溶液每个浓度分别记录五组吸光度数值,取其平均值,以减小误差;以吸光度A为纵坐标,芦丁浓度C(mg/ml)为横坐标,标准曲线方程为:y=13.187x+0.0117(R2=0.9981,R=0.9990);
(5)、单因素实验
以黄酮含量为指标,采取单因素法考察液料比,提取时间,提取温度对黄酮含量的影响。
①、液料比对黄酮含量的影响
按照步骤(1)所述方法加热提取,固定提取时间、温度,考察不同液料比,对黄酮含量的影响,每个实验重复3次,测定吸光度,计算黄酮含量;
②、提取温度对黄酮含量的影响
按照步骤(1)所述方法加热提取,固定液料比、时间,考察不同提取温度,对黄酮含量的影响,每个实验重复3次,测定吸光度,计算黄酮含量;
③、提取时间对黄酮含量的影响
按照步骤(1)所述方法加热提取,固定液料比、温度,考察不同提取时间,对黄酮含量的影响,每个实验重复3次,测定吸光度,计算黄酮含量;
(6)、响应面法优化工艺
根据Box-Benhnken的中心组合实验设计原理,综合单因素实验影响结果,在单因素实验的基础上采用三因素三水平响应面分析方法,分析因素与水平设计与响应面分析方案及实验结果;
(7)、正交法优化工艺验证
以时间A、温度B、料液比C为实验因素,以黄酮含量为考察指标,进行L9(34)正交设计实验。
2.根据权利要求1所述的一种优化苏格木勒-4汤中黄酮含量的方法,其特征在于:所述相应倍数包括10倍、20倍、30倍、40倍或50倍。
3.根据权利要求1所述的一种优化苏格木勒-4汤中黄酮含量的方法,其特征在于:所述规定温度包括80℃、85℃、90℃、95℃或100℃。
4.根据权利要求1所述的一种优化苏格木勒-4汤中黄酮含量的方法,其特征在于:所述规定时间包括30min、60min、90min、120min或150min。
5.根据权利要求1所述的一种优化苏格木勒-4汤中黄酮含量的方法,其特征在于:所述最大吸收波长为510纳米。
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