[发明专利]一种血清miRNA标志物及其检测电离辐射损伤的方法有效
| 申请号： | 201811494228.5 | 申请日： | 2018-12-07 |
| 公开（公告）号： | CN109385472B | 公开（公告）日： | 2021-10-08 |
| 发明（设计）人： | 危文俊;王菊芳;华君瑞;何进鹏 | 申请（专利权）人： | 中国科学院近代物理研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12N15/113 |
| 代理公司： | 兰州中科华西专利代理有限公司 62002 | 代理人： | 李艳华 |
| 地址： | 730000 甘*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 血清 mirna 标志 及其 检测 电离 辐射损伤 方法 | ||
1.一种血清miRNA标志物在制备诊断电离辐射损伤试剂中的应用，其特征在于：该miRNA标志物是miR-134-5p和miR-155-5p的组合；所述miR-134-5p的成熟序列为5’-UGUGACUGGUUGACCAGAGGGG -3’；所述miR-155-5p的成熟序列为5’-UUAAUGCUAAUUGUGAUAGGGGU-3’。
2.如权利要求1所述的一种血清miRNA标志物在制备诊断电离辐射损伤试剂中的应用，包括以下步骤：
⑴利用miR-134-5p反转录引物、miR-155-5p反转录引物、反转录预混液将血清miRNA标志物逆转录为cDNA；
⑵利用miR-134-5p正向扩增引物、miR-155-5p正向扩增引物，通过实时荧光定量PCR技术分别对cDNA中的miR-134-5p和miR-155-5p进行扩增，并利用2-△△Ct方法对所述miRNA标志物的相对变化量进行计算；
⑶将待测血清样本与正常血清样本中所述miRNA标志物进行比较，当miR-134-5p相对表达变化量上升超过1.5倍，同时miR-155-5p相对表达变化量下降超过1.5倍时，则确定待测对象有受到电离辐射损伤的风险。
3.如权利要求2所述的一种血清miRNA标志物在制备诊断电离辐射损伤试剂中的应用，其特征在于：所述步骤⑵中miR-134-5p反转录引物序列为5’-GTCGTATCCAGTGCGTGTCGTGGAGTCGGCAATTGCACTGGATACGACCCCCTC-3’。
4.如权利要求2所述的一种血清miRNA标志物在制备诊断电离辐射损伤试剂中的应用，其特征在于：所述步骤⑵中miR-155-5p反转录引物序列为5’-GTCGTATCCAGTGCGTGTCGTGGAGTCGGCAATTGCACTGGATACGACACCCCT-3’。
5.如权利要求2所述的一种血清miRNA标志物在制备诊断电离辐射损伤试剂中的应用，其特征在于：所述步骤⑵中反转录预混液是指商品化的miRNA反转录反应预混液。
6.如权利要求2所述的一种血清miRNA标志物在制备诊断电离辐射损伤试剂中的应用，其特征在于：所述步骤⑶中miR-134-5p正向扩增引物序列为5’-TGTGACTGGTTGACCA -3’。
7.如权利要求2所述的一种血清miRNA标志物在制备诊断电离辐射损伤试剂中的应用，其特征在于：所述步骤⑶中miR-155-5p正向扩增引物序列为5’-TTAATGCTAATTGTGAT-3’。
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