[发明专利]一种能够直接分析生物液体样品的二维液相色谱仪

说明书

本发明提供了一种能够直接分析生物液体样品的二维液相色谱仪，包括：第一流道、第二流道、连接有第二色谱柱的分析流道、废液流道、以及相连接的第一多流道切换阀和第二多流道切换阀；还包括过滤装置；所述过滤装置连接在第一流道上，并连接于第一多流道切换阀的任意一个端口上，所述第一多流道切换阀的任意两端口之间连接有第一色谱柱；所述第二多流道切换阀的任意三个端口上还分别连接有第二流道、废液流道以及分析流道。该二维液相色谱仪通过第一过滤装置的功能先去除大蛋白等分子量较大的物质，实现二维液相色谱大分子量样本直接进样分析，解决样品中含有的大量蛋白带来的堵塞和第一维色谱柱劣化的问题。

技术领域

本发明属于液相色谱领域，具体涉及一种能够直接分析生物液体样品的液相色谱仪。

背景技术

二维液相色谱是在普通液相色谱基础上发展起来的色谱仪器，它通过增加色谱分离级数和色谱柱数量来提高分离能力，通常第一维液相色谱负责样品的浓缩和初级分离，第二维液相色谱负责样品的进一步分离与检测，从而能够在线处理样品，使目标组分从复杂基质中分离出来。现有的二维液相色谱虽能够实现一定程度的自动完成样品的浓缩、转移与分离，相较于常规液相色谱提高了色谱分离准确性与自动化程度。但是在分析血样中目标组分时，仍需要进行预先蛋白沉淀和提取目标物的过程，这些过程目前仍需人工操作，存在一定的偏差和不可控因素，自动化程度还有提升的空间。

以上的二维液相色谱存在这样的问题：因为需要同时承当浓缩和初级分离的需求，对第一维液相色谱柱有一定的理论塔板数的要求。生物样品中含有的蛋白会引起管路堵塞和第一维色谱柱不同程度的劣化，因此第一维色谱柱使用寿命较短。另一个问题是在批量分析样品时，需要预先人工操作沉淀蛋白和提取目标物，存在转移样品错误、定量不准确和沉淀不完全等问题，导致分析结果的可信度不够高。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明所述的能够直接分析生物液体样品的二维液相色谱仪，旨在通过增加拦阻过滤装置先去除大蛋白等分子量较大的物质，使进入后续系统的蛋白量极少或没有，其后通过第一多流道切换阀将目标物转移至第一色谱柱进行预先分离，通过第二多流道切换阀将目标物转移至第二色谱柱进行进一步分离检测，实现二维液相色谱大分子量样本直接进样分析，解决样品中含有的大量蛋白带来的堵塞和第一维色谱柱劣化的问题。

为实现上述目的，本发明的技术方案是：

一种能够直接分析生物液体样品的二维液相色谱仪，包括：第一流道，用于输送第一流动相；第二流道，用于输送第二流动相；连接有第二色谱柱的分析流道，用于对捕获的物质进行分离和检测；废液流道，用于排出废液；相连接的第一多流道切换阀和第二多流道切换阀，用于连接和切换各流道；所述第一多流道切换阀和第二多流道切换阀上设有多个端口；还包括过滤装置；所述过滤装置连接在第一流道上，并连接于第一多流道切换阀的任意一个端口上，所述第一多流道切换阀的任意两端口之间连接有第一色谱柱；所述第二多流道切换阀的任意三个端口上还分别连接有第二流道、废液流道以及分析流道。

所述过滤装置为过滤筛板或者是一根色谱柱；所述第一流道上连接有自动进样器，所述过滤装置连接在自动进样器之后。

优选方案，所述过滤筛板的孔径＜2微米。

优选方案，所述色谱柱的填料粒径范围为1.2～60微米。

优选方案，所述多流道切换阀(V1)包括端口1、端口2、端口3、端口4，所述多流道切换阀(V2)包括端口5、端口6、端口7、端口8；所述端口1与第一流道连接，所述端口2与端口3之间连接有第一色谱柱(C1)；所述端口5与废液流道(L8) 连接，所述端口6与端口4连接，所述端口7与分析流道连接，所述端口8与第二流道连接。