[发明专利]一种乳酸菌发酵富集元麦多酚及制备抗氧化剂的方法

权利要求书

1.一种乳酸菌发酵富集元麦多酚及制备抗氧化剂的方法，其特征在于，以新鲜元麦为原料，选用植物乳杆菌进行液态发酵，提高元麦中酚类物质的含量。在此基础之上，提取制备的元麦多酚具有更高的抗氧化活性，可以更加有效清除DPPH自由基、氧化自由基，降低氧化损伤细胞中ROS水平，提高细胞中抗氧化酶活力等。其特征在于，按照以下步骤进行：

(1)菌种的筛选：选择植物乳酸菌Lactobacillus plantarum B1-6，Gen Bank序列号KM200717，保藏于南京农业大学食品科技学院微生物实验室；

(2)原料预处理：选择洗净后晾干的元麦仁，研磨、过筛，加入一定比例水，高压灭菌配成元麦乳液；

(3)元麦多酚的富集：活化发酵所用的菌种，按一定比例加入步骤(2)中得到的元麦乳液，封口、置于恒温培养箱中静置培养，得到发酵元麦乳；

(4)抗氧化剂制备：收集上述步骤(3)中得到的发酵元麦乳，进行提取、浓缩、萃取、浓缩、干燥，制备得到发酵元麦提取物，该提取物比发酵前元麦提取物具有更明显的抗氧化能力，可作为抗氧化剂；

(5)具有抗氧化活性食品的制备：按照一定比例，将上述步骤(4)中得到的抗氧化剂加入液体或固体食品中，制成功能性饮料、功能性面包等产品。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的元麦仁研磨、过筛得到大小为40-80目的元麦粉，按比例1∶5-1∶25(以元麦粉质量与水的体积比计)加水，121℃湿热灭菌之后得到元麦乳液。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述菌种活化分两次进行，第一次将Lactobacillus plantarum B1-6冻存管直接投入MRS液体培养基，37℃培养24-60h，取出，以1-10％(以新鲜培养基体积浓度计)加入新鲜MRS液体培养基中进行二次活化，37℃继续培养12-48h，取出，以接种量1-20％(以元麦乳液体积浓度计)加入上述元麦乳液中，30-37℃静置培养12-72h，得到多酚富集后的发酵元麦乳。

4.权利要求1-3任一所述方法得到的发酵元麦乳。

5.权利要求4所述的发酵元麦乳，其特征在于干物质中总酚含量比发酵前提高了0.1-0.8倍(以发酵前元麦乳液干物质中总酚质量浓度的倍数计)。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)中，在发酵元麦乳中加入了1∶1-1∶10(以发酵元麦乳与乙醇-水溶液体积比计)浓度为60-100％乙醇-水溶液(以水的体积浓度计)，30-50℃水浴超声1-4h，5000-10000rpm/min条件下离心1-5min，重复提取3次，收集液体；再以80-150rpm/min为转速，30-50℃水浴条件下旋转蒸发、浓缩上述提取液；在上述浓缩液中加入少量饱和食盐水，按1∶1-1∶5比例(以浓缩后提取液的体积倍数计)加入乙酸乙酯进行萃取，震荡摇匀、静止5-15min，待完全分层，重复萃取3次，收集上层液体；80-150rpm/min、30-50℃条件下旋转蒸发、浓缩上述萃取液；加入1-3mL纯水，溶解残留物；-20℃预冷24-72h上述残留物溶液，-60℃真空冷冻干燥12-60h。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(5)中，将本发明的元麦提取物以一定比例直接加入液体或固体食品中，可以制成具有抗氧化功能的饮料、面包等产品，一般优选1-20％，优选1-10％。

8.权利要求1-7任一所述方法得到的发酵元麦提取物，即本发明的抗氧化剂。

9.权利要求8所述的抗氧化剂，其特征在于，在体外研究及实验中，若抗氧化剂浓度在1-10mg/L(以提取物所溶于溶剂的质量浓度计)之间，可以同时具备多种抗氧化能力，包括更加显著的DPPH自由基清除能力、铁离子还原能力、氧化自由基吸收能力，以及对于细胞氧化损伤更加有效的保护作用，如降低细胞ROS水平、提高细胞SOD酶活力、增加细胞中GSH含量、降低细胞LDH释放量。