[发明专利]应用于NK细胞培养的蛋白质、培养基配方组合及制备方法有效
申请号: | 201811505035.5 | 申请日: | 2018-12-10 |
公开(公告)号: | CN109627342B | 公开(公告)日: | 2022-12-06 |
发明(设计)人: | 李德彬;崔利兰;王笃强;周哲 | 申请(专利权)人: | 苏州近岸蛋白质科技股份有限公司 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C07K1/22;C12N15/62;C12N15/85;C12N5/0783 |
代理公司: | 北京中仟知识产权代理事务所(普通合伙) 11825 | 代理人: | 谢冲 |
地址: | 215200 江苏省苏州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 应用于 nk 细胞培养 蛋白质 培养基 配方 组合 制备 方法 | ||
1.一种重组MICA-Ig蛋白的应用,所述MICA-Ig为以肿瘤细胞表面的人类MICA蛋白和人免疫球蛋白IgG1的Fc段融合为的重组MICA-Ig蛋白;所述重组MICA-Ig氨基酸序列如SEQ IDNo.6,其特征在于,所述重组MICA-Ig蛋白用于人NK细胞非滋养层体外培养中,所述重组MICA-Ig蛋白的应用步骤为取人血液,分离PBMC,细胞计数后将细胞密度调整到2X106/ml,将细胞加入到预先用4-1BBL工作浓度1~10ug/ml、NovoNectin工作浓度5~50ug/ml和所述的MICA-Ig工作浓度 2~20ug/ml包板的孔板中,加入培养因子IL-18工作浓度10~500ng/ml、IL15RAIL15融合蛋白工作浓度10~500ng/ml、anti-HER2工作浓度0.1~10ug/ml和Anti-CD16工作浓度0.1~10ug/ml培养,每次补液都含上述培养因子,维持细胞密度在2X106/ml,7~9天后,将培养因子更换为IL-2工作浓度10ng/ml调整细胞密度到1X106/ml继续培养。
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