[发明专利]间充质干细胞免疫调节能力的检测方法在审
| 申请号： | 201811507077.2 | 申请日： | 2018-12-10 |
| 公开（公告）号： | CN109609584A | 公开（公告）日： | 2019-04-12 |
| 发明（设计）人： | 徐永胜;王秀娟;倪琳;杨莹 | 申请（专利权）人： | 天津长和生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 李进 |
| 地址： | 301900 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 间充质干细胞 免疫调节能力 变化量 检测 淋巴细胞分泌 淋巴细胞亚群 待测样本 原始样本 淋巴细胞增殖能力 淋巴细胞增殖 生物技术领域 充质干细胞 比例变化 差异化 种间 | ||
1.一种间充质干细胞免疫调节能力的检测方法，其特征在于，分别检测待测样本中的淋巴细胞亚群的比例、淋巴细胞分泌TNF-α的能力和淋巴细胞增殖的能力；
所述待测样本为原始样本与间充质干细胞共培养后得到；
与原始样本相比，所述淋巴细胞亚群的比例变化越大，所述淋巴细胞分泌TNF-α越受到抑制并且所述淋巴细胞增殖越受到抑制，所述间充质干细胞免疫调节能力越强。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述淋巴细胞亚群包括Treg细胞、Th1细胞和Th17细胞；
优选地，所述间充质干细胞提高所述Treg细胞在淋巴细胞亚群中的比例；
优选地，所述间充质干细胞降低所述Th1细胞在淋巴细胞亚群中的比例；
优选地，所述间充质干细胞降低所述Th17细胞在淋巴细胞亚群中的比例。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述Treg细胞表型为CD4+CD25+CD127-。
4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述Th1细胞表型为CD3+CD8-INF-γ+。
5.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述Th17细胞表型为CD3+CD8-IL-17+。
6.根据权利要求1-5任一项所述的检测方法，其特征在于，采用流式细胞仪定量分析的方法检测所述淋巴细胞亚群的比例。
7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，将原始样本与抑制剂处理过的间充质干细胞共培养，添加刺激剂活化淋巴细胞，检测待测样本上清液中的TNF-α浓度，其中，所述抑制剂抑制间充质干细胞的增殖和蛋白合成；
优选地，所述抑制剂包括丝裂霉素；
优选地，所述刺激剂包括PHA。
8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，将原始样本与经钴-60照射3000rad处理过的间充质干细胞共培养，添加刺激剂活化淋巴细胞，检测待测样本中淋巴细胞增殖的能力；
优选地，所述刺激剂包括PHA。
9.根据权利要求7或8所述的检测方法，其特征在于，所述间充质干细胞和所述原始样本的细胞数量比为(0.05-5)：1。
10.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述原始样本包括PBMC。
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