[发明专利]一种六基因缺失的猪伪狂犬病毒、猪伪狂犬病疫苗以及制备方法

说明书

本发明公开了一种六基因缺失的猪伪狂犬病毒、猪伪狂犬病疫苗以及制备方法，涉及动物生物制品领域。本发明提供六基因缺失的猪伪狂犬病毒的保藏编号为CGMCC No：16290。该六基因缺失的猪伪狂犬病毒缺失六个基因，致病性被去除，其免疫原性被有效保留，使用该猪伪狂犬病毒制备的疫苗，可诱导机体产生更高级剂量的干扰素，在紧急免疫接种方面具有更好的免疫效果。

技术领域

本发明涉及猪伪狂犬病疫苗领域，具体而言，涉及一种六基因缺失的猪伪狂犬病毒、猪伪狂犬病疫苗以及制备方法。

背景技术

猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)又称奥耶斯基氏病(Aujeszky's disease,AD)，是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)所引起的猪、牛、羊等多种家畜和野生动物以发热、奇痒(猪除外)及脑脊髓炎为主要症状的一种高度接触性传染病。猪是该病的天然宿主、主要储存宿主和传染源，无论是新生仔猪、育肥猪，还是成年种猪，都受到PR的威胁。其表现症状为：2周龄内仔猪感染后死亡率很高，可达100％，可出现腹泻、呕吐、共济失调、角弓反张、四肢泳动等神经症状，最后麻痹、衰竭死亡；断奶仔猪也能引起死亡，但主要表现为呼吸系统症状，也有部分猪出现神经症状、腹泻、呕吐等，耐过的仔猪往往发育不良，成为僵猪；育肥猪感染后则大多数伴有体温升高，呼吸困难，偶有神经症状，一般不发生死亡；成年猪感染后不发病或仅表现为体温升高等轻微症状，呈隐形感染，耐过后主要表现生长发育迟缓，饲料报酬降低等，并可长期带毒或排毒，成为最危险的传染源；妊娠母猪感染后会导致流产、产死胎、木乃伊胎等；该病还可引起种猪不育、公猪睾丸肿胀、母猪返情、屡配不孕等。

伪狂犬病毒只有一个血清型，但不同毒株在毒力和生物学特征等方面存在差异。疫苗接种是有效防制猪伪狂犬病最经济、有效的方法。但现有的猪伪狂犬病疫苗的免疫效果并不理想。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种六基因缺失的猪伪狂犬病毒，该猪伪狂犬病毒是经人工改造后得到的，其缺失六个基因，致病性被去除，其免疫原性被有效保留，使用该猪伪狂犬病毒制备的疫苗，可诱导机体产生更高级剂量的干扰素，在紧急免疫接种方面具有更好的免疫效果。

本发明的另一目的在于提供上述猪伪狂犬病毒的应用。

本发明的另一目的在于提供一种猪伪狂犬病疫苗，该疫苗由上述六基因缺失的猪伪狂犬病毒制成，其具有较好的免疫效果。

本发明的另一目的在于提供一种制备上述猪伪狂犬病疫苗的方法。通过该方法制得的猪伪狂犬病疫苗，具有较好的免疫效果。

本发明是这样实现的：

2011年前后在全国范围了出现了新的猪伪狂犬病疫情，主要表现为突发性大面积种猪流产，育肥猪致死性感染，猪群gE抗体阳性率突然升高，部分猪场gE抗体阳性率高达100％。疫情爆发的不同地区，免疫状况不同而呈现出不同的临床表现。免疫状况较好的猪场，大多无明显临床症状，但猪群gE阳性率突然升高；免疫状况较差的猪场，主要表现为种猪的大面积流产、仔猪腹泻、育肥猪呼吸道症状与急性死亡。新疫情爆发以后全国多个实验室分离到新的猪伪狂犬病毒流行毒株，经过致病力实验、免疫保护实验和分子流行病学等研究，一致认为新流行的猪伪狂犬毒株在主要毒力基因gE、gI基因，以及与免疫保护相关的基因gB、gC、gD上存在多个位点的变异。我国不同地区分离的新流行毒株，与目前广泛使用的猪伪狂犬病活疫苗Bartha K61毒株位于不同的基因亚型，动物试验与中和抗体检测均证实，Bartha K61毒株对我国当前流行的猪伪狂犬病毒保护效果较弱，本发明使用新分离的变异毒株构建了TK、gE、gI、11K、28K和gG等6个基因缺失的伪狂犬病活疫苗，与市场上使用的TK/gE/gI、gE/gI基因确实疫苗相比较，该疫苗能够诱导机体产生更高级剂量的干扰素，在紧急免疫接种方面具有更好的效果。使用流行毒株构建的基因缺失疫苗能够为仔猪提供100％免疫保护。