[发明专利]一种检测流感病毒的试纸条及制备方法

说明书

本发明公开了一种检测甲型/乙型流感病毒的时间分辨免疫层析试纸条及制备方法，该试纸条包括底板以及依次黏贴在所述底板上的样品垫、结合垫、反应膜和吸水垫，所述结合垫上包被有时间分辨荧光微球标记的甲型/乙型流感病毒单克隆检测抗体，所述反应膜包括平行设置且相互间隔的检测区和质控区，所述检测区靠近所述结合垫，所述质控区靠近所述吸水垫，所述检测区和质控区分别包被有识别单一抗原表位的甲型/乙型流感病毒单克隆捕获抗体和羊抗鼠IgG抗体。本发明的甲型/乙型流感病毒时间分辨免疫荧光层析试纸条灵敏度高，操作简单，成本低，检测时间短，其能够有效满足临床快速检验的需求。

技术领域

本发明涉及医学检验技术，特别是涉及一种检测流感病毒的时间分辨荧光免疫层析试纸条及制备方法。

背景技术

流行性感冒(简称流感)是流感病毒引起的急性呼吸道感染，也是一种传染性强、传播速度快的疾病。其主要通过空气中的飞沫、人与人之间的接触或与被污染物品的接触传播。典型的临床症状是：急起高热、全身疼痛、显著乏力和轻度呼吸道症状。一般秋冬季节是其高发期，所引起的并发症和死亡现象非常严重。该病是由流感病毒引起，可分为甲、乙、丙三型，其中甲型所引起的流感流行最为广泛和严重，乙型常引起爆发，丙型则多引起小儿散发病型。甲型病毒经常发生抗原变异，传染性大，传播迅速，极易发生大范围流行。感染后的症状主要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等，多数伴有严重的肺炎，严重者心、肾等多种脏器衰竭导致死亡。甲型流感病毒中至今发现能直接感染人的禽流感病毒亚型有：H1N1、H5N1、H7N1、H7N2、H7N3、H7N7、H7N9、H9N2和H10N8，其中H1、H5、H7、H9为高致病性。乙型型流感病毒是一种传染性强、传播速度快的疾病。其主要通过空气中的飞沫、人与人之间的接触或与被污染物品的接触传播。一般秋冬季节是其高发期，可引起局部爆发流行，但不会引起世界性流感大流行。

甲型流感病毒/乙型流感病毒的检测方法主要包括：

荧光PCR法--该方法对模板RNA质量要求高，检测灵敏度高，但是需要专门实验室，检测时间也较长；金标法---该法具有快速简便，易观察的特点，但是灵敏度不高；病毒分离法---该方法准确，周期长，操作需要专门实验室；酶联免疫法---该方法准确，灵敏度高，但是操作复杂，周期长。

时间分辨荧光免疫层析法是一种新型的POCT检测方法，用镧系元素作为示踪物，标记抗体，免疫反应发生时，用时间分辨荧光分析仪测定免疫反应最后产物的荧光强度，再根据荧光强度判断反应体系中分析物的浓度，达到检测分析的目的。时间分辨免疫层析最主要特点是强调出结果快速，大大缩短了实验结果周转时间。对于急诊治疗和抢救的病人，这些病人往往情况危急且病因不明，而传统的临床检验室测量时间一般要2小时以上，POCT一般在10分钟以内即可完成测试，医生根据POCT提供的信息，对病人及时作出初步诊断。鉴于流感多发基层的特点，目前迫切需要一种无需昂贵的检测设备，能够在基层推广使用，且检测结果实时在线，检测灵敏，检测准确性高的新型现场超敏检测技术进行推广使用。

POCT每一个测试单元都是独立的，因此无法保证每个测试单元质量都是一样。基于免疫层析试纸条和仪器都会因温度、湿度和pH值的不同，影响检测结果。部分POCT仪器方法学的缺陷，灵敏性和重复性欠佳，线性范围窄，只是急诊或者急求时用于参考，必要时还需送到检验科进行复查。

发明内容

本发明的主要目的在于克服现有技术的不足，提供一种灵敏度高、操作简单、成本低、检测时间短的甲型/乙型流感病毒时间分辨免疫荧光层析试纸条，使其能够满足临床快速检验的需求。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：