[发明专利]一种荷叶原花青素及其制备方法

说明书

本发明公开了一种荷叶原花青素及其制备方法，所述方法是将荷叶洗净、干燥后粉碎，经脱脂、酸性乙醇水溶液提取得原花青素粗提液，原花青素粗提液经抽滤、减压浓缩、加乙醇离心分离后，采用管式膜对清液过滤去除生物大分子得原花青素细滤提取液，再经高速逆流色谱纯化分离，收集流出液，浓缩干燥后得到荷叶原花青素。本发明的方法具有工艺简单、操作方便等优点。

技术领域

本发明属于荷叶功能成分提取技术领域，具体涉及一种荷叶原花青素及其制备方法。

背景技术

荷叶的保健功能早己被我国人民所认识，具有悠久的食用与药用历史。《本草纲目》载：“荷叶服之，令人瘦劣。单服可以消阳水浮之气”。1991年11月中华人民共和国卫生部的卫监发1991年第45号文件中，荷叶己被列入第二批“既是食品又是药品”的名单之中。研究表明：荷叶富含原花青素、槲皮素、邻二羟基苯酚等，具有清除自由基、抗氧化等多种生物活性。

原花青素(Proanthocyanidin简称PC)是植物中广泛存在的一大类原花青素类化合物的总称。由不同数量的儿茶素、表儿茶素或没食子酸经C4-C6或C4-C8键缩合而成。按照聚合度的不同，一般将二～四聚体称为低聚体，五聚体以上的称为髙聚体。原花青素是目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂，实验证明，其抗氧化活性和清除自由基能力是VC的20倍、VE的50倍，并且还具有保护心血管、抗氧化、抗突变、抗癌、抗辐射、促进细胞增殖等多种生物学活性，且无毒性。

目前文献报道，李志诚历经多次柱层析,得到没食子酸(gallic acid)、正二十八烷(octacosane)、正十八烷酸(stearic acid)等物质[李志诚.荷叶化学成分的研究[J].中草药,1996,(9):50]。该法分离周期长，回收率低，分离效果不理想。2015年，发明专利CN103664855A一种高纯度低聚体莲房原花青素制备方法，制备流程为：新鲜莲房→干燥、粉碎→6～10倍溶剂、热回流3～5次→提取液(A)→浓缩(B)→离心得上清液(C)→C上大孔树脂柱，梯度洗脱得洗胶液D、E→D、E分别冻干得低聚体莲房原花青素、高聚体莲房原花青素。同年，发明专利CN 106883208 A,一种从香蕉皮中提取原花青素的方法，提取工艺为：备料→护色、打浆→果胶、纤维素酶混合缓冲液酶解→乙醇提取液→上AB-8大孔树脂柱纯化→真空干燥。此传统提取方法具有提取效率低、操作复杂、溶剂用量大、耗时长及污染严重等缺点。

发明内容

本发明旨在解决现有技术中存在的技术问题。为此，本发明提供一种荷叶原花青素及其制备方法，目的是从荷叶中提取出具有高抗氧化活性的原花青素。

为了实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种荷叶原花青素的制备方法，所述方法是将荷叶洗净、干燥后粉碎，经脱脂、酸性乙醇水溶液提取得原花青素粗提液，原花青素粗提液经抽滤、减压浓缩、加乙醇离心分离后，采用管式膜对清液过滤去除生物大分子得原花青素细滤提取液，再经高速逆流色谱纯化分离，收集流出液，浓缩干燥后得到荷叶原花青素。

优选的，所述制备方法具体包括如下步骤：

步骤一、选料、粉碎：将新鲜荷叶洗净、烘干、粉碎，得干荷叶粉A；

步骤二、脱脂：为了使提取溶剂更好地渗入荷叶内部，将干荷叶粉A浸泡于石油醚中进行脱脂，滤出石油醚后得脱脂荷叶粉B；

步骤三、提取：将脱脂荷叶粉B与质量分数10％～40％酸性乙醇水溶液按料液比1:10～20g/mL回流提取12h，回流温度不超过35℃，静置、抽滤后收集清液，经旋转蒸发浓缩得浓缩液C；

步骤四、除生物大分子：加入浓缩液3～5倍体积的体积分数为95％的乙醇，放置过夜，经离心后得上层清液D，在0～20℃下采用管式膜对清液D纳滤得原花青素细滤提取液；