[发明专利]一种甜菜耐碱胁迫的长链非编码RNA基因及其制备方法与应用在审
申请号: | 201811512135.0 | 申请日: | 2018-12-11 |
公开(公告)号: | CN111304197A | 公开(公告)日: | 2020-06-19 |
发明(设计)人: | 邹春雷;李彩凤;刘磊;王彬;陈婧婷;刘新宇;张树友;赵猛;王玉波;刘丹;武沛然;杨芳芳 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/10;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 邓宇 |
地址: | 150030 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 甜菜 胁迫 长链非 编码 rna 基因 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种甜菜耐碱胁迫的长链非编码RNA基因,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.含有权利要求1所述的甜菜耐碱胁迫的长链非编码RNA基因的重组载体或重组菌。
3.权利要求1所述的甜菜耐碱胁迫的长链非编码RNA基因的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)将甜菜进行碱胁迫处理;
2)提取碱胁迫处理后的甜菜总RNA;
3)反转录制备cDNA;
4)以cDNA为模板,利用如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的引物序列PCR扩增制备获得甜菜耐碱胁迫的长链非编码RNA基因lncRNA LNC_008366。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述甜菜为甜菜品种KWS0143。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述碱胁迫处理是指分别将四周龄的甜菜经75mmol·L-1盐碱液处理1、3、5和7天,所述盐碱液为NaHCO3与Na2CO3的混合溶液,胁迫处理后,将不同处理天数的甜菜样品混合,用于步骤2)提取总RNA。
6.权利要求1所述甜菜耐碱胁迫的长链非编码RNA基因在提高植物盐碱胁迫抗性中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,包括如下步骤:
1)构建含有权利要求1所述甜菜耐碱胁迫的长链非编码RNA基因的植物表达重组载体;
2)将植物表达重组载体转化宿主植物,经筛选获得具有盐碱胁迫抗性的转基因植株。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,步骤1)所述构建植物表达重组载体所用的载体为pCBM。
9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,步骤2)所述植物表达重组载体通过农杆菌介导法转化宿主植物。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述农杆菌为农杆菌EHA105;所述宿主植物为烟草。
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