[发明专利]一种定量检测人细小病毒IgG抗体的试剂盒

说明书

本发明公开了一种定量检测人细小病毒IgG抗体的试剂盒，包括磁微粒混悬液、酶结合物、样品稀释液、校准品、发光底物及浓缩洗液；其中磁微粒混悬液中的固相载体为羧基化粒径为0.05‑1um磁微粒，包被抗原为基因重组抗原；酶结合物的酶标抗体为辣根过氧化物酶标记的鼠抗人IgG抗体。本发明试剂盒可利用全自动化学发光免疫分析仪对样本进行定量检测分析，具有操作简便、检测时间短、检测更加准确、检测线性范围宽的优点。

技术领域

本发明涉及体外诊断免疫检测技术，尤其是涉及一种定量检测人细小病毒IgG抗体的试剂盒。

背景技术

人类细小病毒B19（HPVB19）是线性单链DNA病毒，基因组大小为 5.6kb，归类为细小病毒亚科红病毒属。血液制品、2-7岁的儿童是HPV B19 病毒的主要传染源，呼吸道、血制品及母婴垂直传播是其常见的传播途径。HPV B19感染遍布全球，根据年龄和地域分布，感染率并不相同。大约有15%的学前儿童，50%成年人和85%老年人血清学阳性。HPV B19一般引起自限性疾病，感染症状因宿主的免疫功能及血液学体质的不同而异。感染儿童最典型的症状是传染性红斑(第五病)；成人B19感染最常见的症状是关节炎和关节痛；孕妇感染 B19会导致胎儿水肿及胎儿贫血，严重时可导致流产，HPV B19被认为是仅次于HCMV的宫内感染最主要的病原之体一；对于免疫缺陷病人，如艾滋病患者、接受化疗或器官移植手术的癌症病人，因感染B19后不能产生中和抗体而导致慢性贫血，短暂的再生障碍性危象以及急性淋巴白血病等严重疾病，严重时可导致死亡。

抗体检测是目前临床诊断及流行病学调查B19感染的主要方法，检测方法主要有ELISA和胶体金，其不足之处有以下几点：1、手工操作，加样不精确；操作时间长、过程繁琐，易发生操作差错；这些误差和差错均会影响检测结果的准确度和精密度。2、检测过程处于开放的空间，容易引起各种试剂之间的交叉污染，进而影响检测结果的准确性。3、方法学上胶体金分析灵敏度低，肉眼判读结果也存在人为误差。4、基本上皆为定性产品，线性范围窄；定性产品用一个简单的颜色反应点来判定结果，容易产生假阳性或假阴性结果。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用化学发光法来定量检测人细小病毒IgG抗体的试剂盒，该试剂盒具有灵敏度高、线性检测范围广、重现性高等优点，且能自动化操作。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的定量检测人细小病毒IgG抗体的试剂盒，包括B19-IgG磁微粒混悬液、磁微粒B19-IgG酶结合物、磁微粒B19-IgG样品稀释液、磁微粒B19-IgG校准品、发光底物及浓缩洗液；其中B19-IgG磁微粒混悬液中的固相载体为羧基化粒径为0.05-1um磁微粒，包被抗原为基因重组抗原；所述磁微粒B19-IgG酶结合物的酶标抗体为辣根过氧化物酶标记的鼠抗人IgG抗体。

所述B19-IgG磁微粒混悬液中的封保液为PH7～8的PBS缓冲液，其中包含防腐剂、蛋白质类稳定剂和表面活性剂。

所述磁微粒B19-IgG样品稀释液为PH7～8的PBS缓冲液，其中包含防腐剂、蛋白质类稳定剂及表面活性剂。

所述磁微粒B19-IgG校准品由B19-IgG高值阳性稀释配制的在0～100IU/mL之间的6个不同浓度点；其中校准品稀释液为PH7～8的PBS缓冲液，其中包含防腐剂，蛋白质类稳定剂和表面活性剂。

所述PH7～8的PBS缓冲液中的防腐剂为防腐剂Proclin300、MIT、Bro、IPBC或NaN₃中的一种或两种以上混合物；所述蛋白质类稳定剂为酪蛋白、鱼明胶或牛血清白蛋白中的一种或两种以上混合物；所述表面活性剂包括Triton X-100、Tween20、Tween60或辛基酚聚氧乙烯醚中的一种或两种以上混合物。