[发明专利]一种杨树抗旱基因及其应用有效
申请号: | 201811523555.9 | 申请日: | 2018-12-13 |
公开(公告)号: | CN109384837B | 公开(公告)日: | 2021-07-13 |
发明(设计)人: | 夏新莉;周扬颜;刘超;尹伟伦;韩潇;张月 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C12N15/29;C12N15/82;A01H5/06;A01H6/00;C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京五洲洋和知识产权代理事务所(普通合伙) 11387 | 代理人: | 刘春成;荣红颖 |
地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 杨树 抗旱 基因 及其 应用 | ||
1.一种用于改良杨树性状或用于改良所述杨树性状的育种的方法,所述杨树性状包括:
(a)抗干旱性;
(b)二氧化碳同化率;
(c)生长速度;
(d)根呼吸速率;
(e)根导水率;
(f)根的生长;
(g)根的木质素浓度和结构;
所述杨树为84K杨树或黑杨NE19;
所述方法为将重组农杆菌转化到杨树当中,形成所述转基因杨树;
所述重组农杆菌包含编码如SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列的核酸序列的杨树基因的表达载体。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
(1)菌液活化:将所述重组农杆菌的菌液在含利福平和卡那霉素的YEB培养液中培养,形成第一混合物;将所述第一混合物离心,弃上清,形成第一沉淀;用添加乙酰丁香酮的WPM培养液重悬所述第一沉淀,形成第二混合物;
(2)农杆菌侵染:将无菌杨树组培苗幼嫩的叶片放入所述第二混合物中浸染;
(3)共培养:吸干浸染后叶片上的液体成分,将所述叶片置入WPM共培养基,暗培养;
(4)选择培养:
将所述共培养的叶片转移到WPM选择培养基上,在光照下培养,形成抗性不定芽;
(5)筛选生根培养:
将所述抗性不定芽转入WPM生根培养基中培养,形成生根杨树幼苗。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,
所述农杆菌为GV3101。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,
所述基因工程表达载体的基础载体为PBI121质粒。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,
所述核酸序列如SEQ ID NO.5所示。
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