[发明专利]利用机械损伤高效合成血根碱和白屈菜红碱的方法

权利要求书

1.一种利用机械损伤高效合成血根碱和白屈菜红碱的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

(1)培育无菌组培苗：选取按照16小时光培养和8小时暗培养，光照强度为4500～9000Lx，培养60天的无菌组培苗备用；

(2)使用无菌针头将步骤(1)培育的无菌组培苗的幼苗叶片扎8～12个孔，然后置于MS培养基中，25℃下在16小时光周期下培育24～120h；

(3)提取步骤(2)经过扎孔处理培育后的无菌组培苗中的代谢产物并进行定量分析，即得。

2.根据权利要求1所述的利用机械损伤高效合成血根碱和白屈菜红碱的方法，其特征在于，

步骤(2)机械损伤的方法是用无菌解剖刀在步骤(1)培育的无菌组培苗的幼苗叶片上轻划2～3道伤口。

3.根据权利要求1或2所述的利用机械损伤高效合成血根碱和白屈菜红碱的方法，其特征在于，

步骤(2)所得无菌组培苗在提取代谢产物之前应当立刻置于液氮中-70℃下冷冻储存，待用。

4.根据权利要求1或2所述的利用机械损伤高效合成血根碱和白屈菜红碱的方法，其特征在于，

步骤(3)的提取方法如下：

将步骤(2)获取的无菌组培苗的植物组织与甲醇混合，混合比例为：0.05～0.1mg/ml，然后超声提取30～40分钟，并以14000～15000rpm离心15～20分钟，并通过0.22mm膜滤器过滤，即得。

5.根据权利要求1或2所述的利用机械损伤高效合成血根碱和白屈菜红碱的方法，其特征在于，

步骤(1)具体为：将采摘的博落回外植体先用75％酒精浸泡，再用0.1％升汞进行消毒处理，完成消毒灭菌处理；在无菌工作台中，用无菌解剖刀在外植体上轻划2～3道伤口，最后接种到MS固体培养基(市场上直接购买的MS加水调节成4.42g/L，加30g/L蔗糖，调节pH＝5.8，加入0.3％植物凝胶调成固体培养基)上，置于25℃暗培养箱中培养，待长出愈伤，再置于25℃，16小时光培养和8小时暗培养后长出无菌组培苗。