[发明专利]一种辣木根多糖MRP-1及其提取纯化方法以及应用

说明书

本发明涉及一种辣木根多糖MRP‑1及其提取纯化方法以及应用。所述辣木根多糖MRP‑1单糖组成比例为鼠李糖:阿拉伯糖:果糖:木糖:甘露糖:半乳糖＝1.5:2.0:3.1:6.0:5.3:1.1。所述辣木根多糖MRP‑1的提取纯化方法包括热水浸提、无水乙醇沉淀、使用Q‑Sepharose Fast Flow离子交换柱层析分离、再经过透析袋透析脱盐，最后真空干燥得到单一组分辣木根多糖MRP‑1，与传统工艺相比，本发明采用强阴离子(三甲胺基烷基季铵基)交换柱层析即可得到单一的MRP‑1多糖组分，纯化效率高，纯化的效果好。本发明的辣木根多糖MRP‑1具有良好的免疫增强活性，可以用作例如化疗、感冒生病等免疫力低下人群的免疫增强制剂或者应用在疫苗佐剂中。

技术领域

本发明属于天然化学领域，具体涉及一种辣木根多糖MRP-1及其提取纯化方法以及应用。

背景技术

辣木又被称作鼓槌树、辣根树，原产于印度北部，是一种多年生热带、亚热带落叶乔木，在全世界范围内共有14个品种，广泛种植在亚洲、非洲热带和亚热带地区。辣木的叶、花、籽、根以及种子都可以直接食用，具有高钙、高蛋白质、高纤维和低脂质的特性。除食用价值较高外，辣木还能够增强人体免疫力，促进身体健康，预防疾病，在印度、非洲等国家或地区用于治疗疾病，被称为保健之宝。临床证明，辣木在治疗糖尿病、骨质疏松、高血压、预防感染、抗病毒、抗炎症、抗肿瘤等方面也发挥着重要作用。

免疫调节是指在各种因素的影响下，机体的免疫应答适度，以维持机体内环境的相对稳定。在机体免疫功能低下的情况下，免疫增强剂可以使低下的免疫功能提高，增强机体的抗肿瘤作用、抗感染能力等。因此，免疫增强剂在临床上可用于免疫缺陷疾病、恶性肿瘤的辅助治疗以及难治性病原菌的感染等，或者可作为佐剂用于新型疫苗的研发。

目前辣木多糖的提取和应用主要集中在辣木叶多糖的提取和应用上面，其提取工艺主要有热水浸提法、酸碱提取法。如陈瑞娇提出以1:20料液比，80℃水浴提取3次，每次1.5h，可以使辣木多糖的提取率达到15.86％，此法虽然工艺简单，但提取耗时较长；还有相关研究证明也可以使用热水浸提-稀碱溶液连用法进行辣木多糖的提取，但提取得到的多糖水溶性较差，并且碱法提取条件严格，较难达到预期效果。目前对辣木叶多糖的功能研究多集中在辣木叶多糖的抗氧化活性和抗炎活性的研究。辣木根作为辣木的一种主要组织，其1.5-2年内生的根组织肥厚、鲜嫩，直接食用有辛辣味，其目前主要将其用于饮食中煲汤的食材。然而对于其根组织中粗多糖的提取、其组分的分离纯化、结构的鉴定及生物学功能尚未进行报道。

发明内容

本发明的主要目的是针对现有技术的缺点，提出一种辣木根多糖MRP-1及其提取纯化方法以及应用。

为达上述目的，本发明依据下述的技术方案实现。

一种辣木根多糖MRP-1，所述辣木根多糖MRP-1单糖组成比例为鼠李糖:阿拉伯糖：果糖：木糖：甘露糖：半乳糖＝1.5:2.0:3.1:6.0:5.3:1.1。

本发明的再一目的在于提供该辣木根多糖MRP-1的提取纯化方法，包括如下步骤：

1)、取原料辣木根，切成片状后，按料液比1:10-1:20的比例加入去离子水，超声-微波提取20-30分钟后，沸水煮2-3个小时，过滤去渣得提取液，将提取液蒸发浓缩后，加入无水乙醇，于0-4℃下沉淀过夜；离心取沉淀，用去离子水将沉淀复溶后，利用Sevag法脱蛋白，重复3-5次，得到辣木根粗多糖组分；

2)、将步骤1)得到的辣木根粗多糖组分经Q-Sepharose Fast Flow离子交换柱层析分离，收集洗脱组分；

3)、将步骤2)收集得到的洗脱组分经3500Da的透析袋透析脱盐，并通过真空冷冻干燥，得到辣木根多糖MRP-1的粉末样品。