[发明专利]抗H7N9全人源单克隆抗体3F12及其制备方法与应用

说明书

本申请涉及抗H7N9全人源单克隆抗体3F12及其制备方法与应用。利用记忆B细胞PCR方法快速筛选全人源单克隆抗体3F12，不含任何鼠源成分。本申请抗体可靶向结合H7N9病毒的血凝素HA，具有显著地抗H7N9病毒感染的中和活性；本申请抗体不发生抗鼠抗抗体等毒副作用，具有更好的生物相容性，更适合和更有潜力成为治疗流感病毒的大分子药物。

技术领域

本申请属于免疫学领域，具体地涉及抗H7N9全人源单克隆抗体3F12及其制备方法与应用。

背景技术

在2015年全球十大畅销药中，有6个是全人源或人源化单克隆抗体药物。排名第一的是艾伯维公司治疗关节炎的抗TNFa单克隆抗体Humira，这是一个全人源单克隆抗体，已经是连续3年销售额100亿以上的药王。从1986年第一个单克隆抗体药物上市开始，单抗药物经历了鼠源单抗药物(如Orthoclone OKT3)、嵌合单抗药物(Rituximab)、人源化单抗药物(Herceptin)和全人源单抗药物(Humira)等阶段。由于人体出现抗鼠抗体反应(HAMA)，鼠源单抗药物、嵌合单抗药物已经逐渐被淘汰，目前占据市场的单克隆抗体药物全都是人源化单克隆抗体药物。与国际先进的人源抗体生产技术相比，深圳乃至全中国都有很大差距，主要表现在人源抗体药物领域的创新能力薄弱，自主研发的品种少，目前还没有原创人源化单克隆抗体药物上市的报道，庞大的抗体药物市场被国外药企占领。我国要改变落后局面，争夺消费潜力巨大的国内外抗体药物市场，亟需攻克全人源单克隆抗体技术。

人源单克隆抗体在治疗炎症、癌症特别是流行性感冒方面具有高特异性的显著疗效。流行性感冒是由流感病毒引起的传染性疾病，严重威胁人类健康。全球每年约有10亿人受季节性流感病毒感染，其中有25-50万人死亡。H7N9病毒是一种流感病毒，对传统的抗病毒药金刚烷胺(amantadine)和金刚烷乙胺 (rimantadine)有耐药性，目前尚没有有效治疗手段。H7N9病毒在入侵细胞时需要依赖病毒自身表达的特定分子与人细胞上的受体结合，才能感染细胞，并进一步扩增。中和病毒的人源抗体是人B淋巴细胞产生的某些特异抗体，能够与病毒表面的抗原结合，从而阻止该病毒黏附靶细胞受体，防止病毒侵入细胞，能够高效防治H7N9流行性感冒。

发明内容

一方面，本申请涉及抗H7N9全人源单克隆抗体3F12或来源于该单克隆抗体的能够中和H7N9病毒的生物活性片段。

另一方面，本申请涉及编码所述抗H7N9全人源单克隆抗体3F12或来源于该单克隆抗体的能够特异性结合H7N9的生物活性片段的基因及含该基因的载体或细胞。

另一方面，本申请涉及产生所述抗H7N9全人源单克隆抗体3F12的方法。

另一方面，本申请涉及包含所述的抗H7N9全人源单克隆抗体3F12或来源于该单克隆抗体的能够特异性结合H7N9的生物活性片段的药物组合物。

另一方面，本申请涉及本申请所述的抗H7N9全人源单克隆抗体3F12或来源于该单克隆抗体的能够特异性结合H7N9的生物活性片段或所述药物组合物的应用。

另一方面，本申请涉及一种检测H7N9病毒的试剂盒。

附图说明

图1为实施例1中NTH-3T3表达CD40L的流式检测结果图。

图2为实施例1中流式细胞仪分选记忆B细胞结果图。

图3为实施例1中ELISA实验结果图。

图4为实施例3中和实验结果图。

具体实施方式

为了对本发明的技术特征、目的和有益效果有更加清楚的理解，现对本发明的技术方案进行以下详细说明，但不能理解为对本发明的可实施范围的限定。