[发明专利]美洲型PRRSV N蛋白抗原表位及其应用

说明书

本发明公开了一种美洲型PRRSV N蛋白抗原表位及其应用，旨在解决对PRRSV N蛋白细胞表位研究不足的技术问题。本发明设计一种短肽，其氨基酸序列如SEQ NO.1所示氨基酸序列；或由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列衍生的具有同等功能的氨基酸序列。筛选一种美洲型PRRSV N蛋白抗原表位，含所述短肽的氨基酸序列。将所述短肽或所述的美洲型PRRSV N蛋白抗原表位在制备预防和/或治疗美洲型PRRSV抗体中应用。本发明提供一种N蛋白新抗原表位，完成了对该表位的鉴定，完善了N蛋白的抗原表位图谱，为美洲型PRRSV交叉保护性表位疫苗的研究打下基础，对PRRSV美洲型、欧洲型的区分检测具有重要意义。

技术领域

本发明涉及细胞免疫技术领域，具体涉及一种美洲型PRRSV N蛋白抗原表位及其应用。

背景技术

猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproduetive and Respiratory Syndrome，PRRS）是目前世界养猪业危害最为严重的病毒性疾病。感染PRRSV 后母猪以生殖障碍为特征，主要表现为早产、晚期流产、死胎、木乃伊胎、发热、厌食等，感染的仔猪表现为呼吸道症状，也有神经症状。在发病过程中会出现两耳皮肤发绀发紫，故又称为“蓝耳病”。接触感染、精液传播、空气传播是PRRSV的主要传播途径，鸟类、鼠类、人类等运输工其都可能成为本病的媒介。猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是引起该病的致病因子。该病毒有两种主要的血清型类型，分别是基因I型（欧洲型）和II型（美洲型）。欧洲型以 Lelystad 株（LV 株）为代表，美洲型以 VR2332 株为代表。感染PRRSV的猪和感染后康复的猪都能排毒，有研究报道能分别从感染后210天的血清、42天的唾液、43～92天的精液、38天的粪便、21天的鼻腔液、28天的尿液、157天的口腔刮脱物中分离到病毒。

表位是病毒结构蛋白的重要抗原元件，一般为2～18氨基酸序列，在诱导和细胞介导的病毒免疫反应中发挥重要作用。根据它们各自的受体不同，表位可以分类为B细胞表位和T细胞表位，同时根据结构不同，表位又分为线性表位和构象表位。

表位的研究对于完善病毒蛋白结构及病毒与宿主作用关系的研究意义重大，同时对病毒的检测，表位疫苗的制备提供材料基础应用价值巨大。

国内外对于PRRSV N蛋白表位的研究并不是非常完善，Meulenberg等人用肽扫描技术对PRRSV I 型N蛋白表位进行分析，得到2～12，25～30，40～463段B细胞表位；多年后，Plagemann等人用基于肽扫描方法对PRRSV II 型N蛋白表位进行分析，得到23～33，31～50，43～563段B细胞表位；T.Q.An等用噬菌体展示技术结合生物套选法对PRRSV II 型N蛋白表位进行分析，获得表位78～87。选择合适的靶抗原研制新型PRRSV疫苗是免疫预防PRRS的研究重点。

然而，如何获得合适的疫苗靶抗原及其表位研制新型PRRSV表位疫苗或药物则一直是本领域技术人员所努力解决的技术难题。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种美洲型PRRSV N蛋白抗原表位及其应用，以解决对PRRSV N蛋白细胞表位研究不足的技术问题。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

设计一种短肽，其氨基酸序列为

（1）如SEQ NO.1所示氨基酸序列；或

（2）由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列衍生的具有同等功能的氨基酸序列。

筛选一种美洲型PRRSV N蛋白抗原表位，具有所述短肽的氨基酸序列。

优选的，所述表位是一种位于N蛋白柔性区的B细胞表位，该区域为PRRSV N 蛋白RNA的结合区。

优选的，所述表位为构象性表位。