[发明专利]一种鱼皮活性多肽的提取方法

权利要求书

1.一种鱼皮活性多肽的提取方法，其特征在于：该提取方法获得的活性多肽分子量不超过3000Da；

所述活性多肽的提取步骤为：取鱼皮胶原粉末，采用中性蛋白酶和胰蛋白酶进行酶解，酶解结束，待冷却后加入正己烷萃取，离心，收集水解液，浓缩、冷冻干燥得鱼皮胶原多肽粉末；

所述鱼皮胶原粉末为经过以下预处理：将鱼皮胶原粉末溶于含有0.5-1%的月桂醇聚氧乙烯醚和0.1-0.6%的水杨酰胺水溶液中，反应3-5min，再进行酶解反应。

2.根据权利要求1所述的一种鱼皮活性多肽的提取方法，其特征在于：提取方法包括脱脂处理，步骤为：将鱼皮在无菌情况下，用组织剪机械剪碎成1×1cm的组织块，浸于乙二醇:乙醚=1-3:1(v/v)溶液中，料液比为1:10-25，于5-30℃下脱脂处理12-48h，连续低速搅拌。

3. 根据权利要求1所述的一种鱼皮活性多肽的提取方法，其特征在于：提取方法包括去杂蛋白，步骤为：将经过脱脂处理的鱼皮置于0.05-0.2M NaOH中连续低速搅拌，于5-20℃去杂12-24h，水洗至中性，置于2-3.5%NaCl中盐析12-24h，蒸馏水透析，取沉淀冷冻干燥得鱼皮胶原粉末。

4.根据权利要求1所述的一种鱼皮活性多肽的提取方法，其特征在于：提取方法包括多肽提取，步骤为：取鱼皮胶原粉末，采用中性蛋白酶:胰蛋白酶=1:1（U/U）作为水解酶，在pH为6-8、温度35-50℃下持续震荡水解2-10小时，酶解结束，待冷却后加入正己烷萃取5-10min，离心，收集水解液，浓缩、冷冻干燥得鱼皮胶原多肽粉末。

5.根据权利要求1所述的一种鱼皮活性多肽的提取方法，其特征在于：提取方法包括抗氧化胶原多肽纯化，步骤为：取鱼皮胶原多肽粉末，采用胃蛋白酶作为水解酶，在pH为6-8、温度25-50℃下持续震荡水解3-5小时，水解液经离心、去沉淀、真空浓缩、喷雾干燥得粗提取胶原多肽；粗提取胶原多肽经凝胶色谱柱层析柱分离纯化得抗氧化胶原多肽。

6.根据权利要求3所述的一种鱼皮活性多肽的提取方法，其特征在于：所述去杂蛋白用NaOH溶液中溶有0.05-0.1%含量的1,2-二苯基乙二胺和0.001-0.01%含量的氨基脲。

7.根据权利要求4所述的一种鱼皮活性多肽的提取方法，其特征在于：所述多肽提取前，先将鱼皮胶原粉末溶于含有0.5-1%的月桂醇聚氧乙烯醚和0.1-0.6%的水杨酰胺水溶液中，反应3-5min，再进行酶解反应；所述中性蛋白酶和胰蛋白酶的酶用量为1000-5000U/g。

8.根据权利要求5所述的一种鱼皮活性多肽的提取方法，其特征在于：所述胃蛋白酶的酶用量为2000-3000U/g。

9.根据权利要求1所述的一种鱼皮活性多肽的提取方法，其特征在于：所述抗氧化胶原多肽用于制备化妆品、食品、医药中抗氧化物质的用途。