[发明专利]一种瘦肉精试纸条及其制备方法

说明书

本发明公开一种瘦肉精试纸条及其制备方法，包括反应垫、硝酸纤维素膜、检测线、质控线、吸收垫、PVC板；在PVC板上铺设硝酸纤维素膜，检测线和质控线包被在硝酸纤维素膜上，吸收垫和反应垫设置在硝酸纤维素膜上方的两侧，吸收垫靠近质控线一端，反应垫靠近检测线；所述反应垫为带有金标克伦特罗抗体的玻璃纤维，所述检测线上包被有克伦特罗抗原，所述质控线上包被有羊抗鼠IgG多抗，以反应垫代替传统的结合垫和样品垫，去除了多次预处理结合垫和样品垫的过程，减少人工处理样品垫和结合垫造成的批内差。

技术领域

本发明属于生物免疫检测领域，具体涉及一种瘦肉精试纸条及其制备方法。

背景技术

盐酸克伦特罗(Clenbuterol Hydrochloride)，又称瘦肉精，是饲料和养殖生产禁止使用的β-兴奋剂类药品，这种药品在畜产品中残留积蓄，通过食物链导致人类产生急性中毒和其他影响，是被全面禁止用作食用动物的促生长剂。根据农业部“食品动物禁用的兽药及其它化合物清单”规定，在10-9ppb数量级上不得检出。目前检测中使用较多的是酶联免疫法(ELISA)试剂盒，它具有抗原-抗体特异反应性，能够定性被测样品结果，即不出现假阴性和尽可能少的假阳性，该法通常作为大量样品的筛选检测，需要酶标仪、离心机及分析天平等仪器，分析和测定步骤都较繁琐。对于定性或定量分析检测有多种方法和技术，如应用两种以上检测原理的高效液相色谱法HPLC或气相色谱法GC，或带连字符(hyphenated)检测技术，即色谱与质谱联用技术-GC-MS或LC-MSn，由此得到待测化合物结构本质质谱图。但该法需要大型仪器，需要特殊场地和专业人员，分析费用高，前处理比较费时。

免疫层析测定法出现于20世纪80年代初期，由该技术制成的免疫层析试纸条通常由以下几部分组成：底板及粘贴在底板上的样品垫、结合垫、纤维素膜、吸收垫等。是将免疫标记技术与层析技术结合的一种新型检测技术，它利用抗原抗体特异性反应形成免疫复合物，进而对待分析物进行定量检测的一种具有高度选择性的分析方法，免疫分析法可以实现对药物、微生物、蛋白类物质、细胞因子及核酸等微量物质的检测，相较于其它检测技术具有：快速、简便、廉价的特点，其专属性强、稳定性好，能够满足高通量、低限量样品的初筛检测的特点。免疫分析法自问世以来，发展迅速以其独特的优势倍受人们青睐，目前它已成为常规实验室诊断的一次技术革命，推动了环境、食品等检测领域以及其它一些尖端科技的发展。

以胶体金为代表的层析技术已发展了20多年，目前仍然广泛应用，免疫金标记技术(immunogold labeling technique)主要利用了胶体金颗粒具有高电子密度的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标记物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法。但由于其只能用于定性或半定量的检测，难以满足检测指标定量化的要求，同时检测结果靠肉眼判断，特别是在检测结果呈弱阳性时，极易造成人为漏检现象，因此存在灵敏度较低等问题，需要进一步完善。目前，研究新型免疫层析技术以替代和完善胶体金免疫层析技术的不足已成为研究热点，新型免疫层析技术不存在胶体金需大量聚集才能显色的缺点，其以特有的光电磁信号放大系统提高检测灵敏度，减少样品的本底干扰，拥有传统标记物所无法比拟的优势，免疫层析技术正朝着定量、高灵敏度、多标记检测等方向发展。