[发明专利]用于提取多糖的海藻的培养方法

权利要求书

1.用于提取多糖的海藻的培养方法，其特征在于：对藻细胞进行富磷培养和磷饥饿培养；所述磷饥饿培养阶段，对藻细胞培养液接种3-5%的轮虫培养液，并采用人工光源进行间歇光照，光强采用35-60mol·m^-2·s^-1，每天光照3-5h，每次光照间隔30min一次。

2.根据权利要求1所述的用于提取多糖的海藻的培养方法，其特征在于：所述富磷培养阶段，培养基中各组分的重量份为：磷肥厂废水100-120份，镁盐0.5-0.8份，钾盐0.5-1.2份，硝酸盐1.5-3.5份，碳酸氢盐1-3份；所述镁盐、钾盐、硝酸盐和碳酸氢盐均为常规的含Mg²⁺、K⁺、NO^3-和HCO^3-的无机盐；并使得Mg²⁺浓度为5-12mg/L，K⁺浓度为520-680mg/L，NO^3-浓度为450-900mg/L，HCO^3-浓度为5-13mg/L。

3.根据权利要求2所述的用于提取多糖的海藻的培养方法，其特征在于：对磷肥厂废水做以下预处理：首先将磷肥厂废水静置沉降0.5-2h，过滤除去漂浮物、泥沙、树叶、塑料袋等体积较大的固形物，然后将污水引入水泥池中曝晒0.1-1天后，在水中加入生石灰，5-8h后再加入明矾，然后搅拌污水，经自然沉淀、发酵、曝光36-48h，撇去水面泡沫等漂浮物，勿搅动池底，取中上层的污水，装入不透光的黑色塑料桶中，密封，0-5℃冰箱或冷库保存，备用；其中，生石灰的加入量为每升水0.5-2g，明矾的加入量为每升水1-2.5g。

4.根据权利要求1所述的用于提取多糖的海藻的培养方法，其特征在于：所述富磷培养阶段，采用摇瓶培养，培养条件为：按藻种/培养基为50-80ml/250ml接种，25-35℃、150-170r/min培养36-48h，离心，收集藻细胞。

5.根据权利要求1所述的用于提取多糖的海藻的培养方法，其特征在于：所述磷饥饿培养阶段，培养基中各组分的重量份为：含糖量5-8%的甜菜糖蜜80-100份，镁盐0.4-0.6份，钾盐0.5-1.0份，硝酸盐2-5份。

6.根据权利要求1所述的用于提取多糖的海藻的培养方法，其特征在于：所述磷饥饿培养阶段，先采用摇瓶培养24-36h，然后将藻细胞转入培养池中继续培养；该培养池为混砖池体，长20米、宽15米、高1.2米，东西走向，以接收更多太阳光照；培养池上方安装一排玻璃，使培养基处于一种半封闭状态，既不阻挡太阳光照射藻液，进行光合作用，又能避免空气中的灰尘、泥沙、树叶、纸屑、原生动物和其它微生物的孢子等进入培养液造成污染；培养期间，保持培养液高度为45cm，培养温度控制在25-30℃，光照强度为3000-12000Lux；在培养池底部安装有小型气泵，使得培养液形成微流动，刺激藻细胞快速生长；每七天对培养液进行更换。

7.根据权利要求6所述的用于提取多糖的海藻的培养方法，其特征在于：所述培养池接种藻细胞之前，将其洗涮干净，并进行紫外灯或高压氮气消毒5-10min，然后加入复方碘消毒液再消毒20-30min。

8.根据权利要求7所述的用于提取多糖的海藻的培养方法，其特征在于：所述复方碘消毒液为含植物提取物1-20g/L与有效碘2-8g/L的混合溶液；复方碘消毒液的制备方法为：将苦参、黄柏、花椒粉碎后采用35-50%乙醇溶液浸泡24-36小时，250-300筛绢过滤，滤液于105-120℃蒸馏提取得植物提取物；将药用碘配置成乳化的膏状物，然后分2-3次加入到植物提取物中，最后一次加入完成后，再加入海藻酸钠和蔗糖脂肪酸酯，搅拌15-20min，直至混合溶液表面均一匀质，得复方碘消毒液，密封于黑色试剂瓶中，贴上标签，置于0-3℃冰箱备用。