[发明专利]一种粪便保存液及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及粪便微生物检测领域，具体而言，涉及一种粪便保存液及其制备方法和应用。一种粪便保存液，所述粪便保存液的溶剂为水，以所述粪便保存液的体积计，各组分的浓度如下：乙二胺四乙酸9‑13g/L，异硫氰酸胍400‑600g/L，1M Tris‑HCl(pH＝7‑10)体积百分数为8％‑10％，氯化钠7‑10g/L，山梨醇50‑80g/L，十二烷基硫酸钠20‑40g/L。该粪便保存液实现了粪便样本的常温保存以及随时随地的采集粪便样本，并且提高了每个菌属微生物DNA的稳定性以及保存时间，而且便于长途运输。

技术领域

本发明涉及粪便微生物检测领域，具体而言，涉及一种粪便保存液及其制备方法和应用。

背景技术

过去10年中，肠道微生物逐渐成为最热门的生物研究领域，这得益于第二代测序手段的成熟和组学思想的发展。宏基因组、宏转录组、代谢组等组学技术逐渐被应用于肠道微生物的研究中，为深入阐明其结构和功能提供了基础。2007年底，美国国立卫生研究院启动了“人类微生物组计划”(human microbiome project)，亚洲乳酸菌协会联盟也发起了“亚洲人肠道菌相与健康研究”计划，各国也纷纷为微生物组学设立了专项计划。研究表明，肠道微生物作为人体代谢的重要参与者，对生理功能起到十分重要的调控作用。肠道微生态环境紊乱会导致宿主多种疾病的发生，如肠易激综合症(IBS)，就是由于患者肠道内变形菌门含量显著升高造成。

目前对肠道微生物的研究主要采用分子生物学方法，相比于传统的体外细菌培养技术，通过对粪便中肠道微生物基因组的分析逐渐成为最可靠的研究手段。而肠道微生物DNA的提取质量成为应用分子生物学技术的前提和试验成功与否的关键。由于肠道菌群的多样性，一旦离开人体，其活性和结构都会发生巨大变化，一种粪便常温保存液成为试验成功的保证。

目前粪便保存的常用方法是液氮速冻，然后-20℃～-80℃保存，这无疑加大了试验的可操作性，不能适用于多样的采集环境。而且常见的粪便保存液，稳定性较差，即使可用于常温保存，也不能保证其中微生物DNA的稳定性。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种粪便保存液，该粪便保存液具有便携性，可随时随地的采集粪便样本，实现了粪便样本的常温保存，并保证其中微生物DNA的稳定。

本发明的第二目的在于提供一种所述的粪便保存液的制备方法，该方法操作简单，而且能够提高保存液的保存时间和稳定性。

本发明的第三目的在于提供一种粪便保存方法，方便快捷，同时也方便了粪便样品的长途运输及长时间保存。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

本发明的第一方面提供一种粪便保存液，所述粪便保存液的溶剂为水，以所述粪便保存液的体积计，各组分的浓度如下：乙二胺四乙酸9-13g/L，异硫氰酸胍400-600g/L，1MTris-HCl(pH＝7-10)体积百分数为8％-10％，氯化钠7-10g/L，山梨醇50-80g/L，十二烷基硫酸钠20-40g/L。

通过上述各成分的添加以及含量的限定，实现了粪便样本的常温保存，能够随时随地对粪便进行采集，并且提高了粪便样本中的各种微生物DNA的稳定性以及保存时间，便于长途运输。