[发明专利]用于检测受试者中MCI和/或AD的方法、试剂盒及筛选化合物的方法

说明书

本发明公开用于检测受试者中MCI和/或AD的方法、试剂盒及筛选化合物的方法。检测受试者中轻度认知障碍MCI和/或阿尔茨海默病AD的方法包括：(1)利用试剂测量从受试者采集的血液样品中的tau蛋白N端片段的含量得到测量值的步骤；(2)将测量值与标准值进行比较的步骤；(3)当测量值高于标准值时，则将受试者检测为患有轻度认知障碍MCI和/或阿尔茨海默病AD，或者将受试者预测为患有轻度认知障碍MCI和/或阿尔茨海默病AD的风险。

技术领域

本发明涉及中轻度认知障碍和/或阿尔茨海默病的检测，具体涉及用于检测受试者中MCI和/或AD的方法、试剂盒及筛选化合物的方法。

背景技术

随着阿尔茨海默病(AD)的分子机理知识的积累，针对该疾病治疗的研究进入了令人鼓舞的阶段。然而，最近的临床药物研究显示急需更有效的临床诊断手段，并急需开发对治疗有响应的生物标记物。测量CSF中的tau蛋白和β-淀粉样蛋白，或通过PET成像定量淀粉样形变或缠结能够鉴定中轻度认知障碍(MCI)，其通常认为是AD的前兆。现今已普遍在临床研究中使用这些标志物。但是PET成本高且使用受到限制，且CSF取样不便且不易连续进行。因此，急需低成本且尽量非侵入的基于血液的生物标志物来代替或补充当前的CSF和PET标志物。

众多研究表明在AD的CSF中tau蛋白增加。通常的分析采用抗tau蛋白中区的单抗来进行，但是作为总的tau蛋白分析其经常不准确。事实上，此类分析(包括普遍使用的Innotest ELISA)不能检测缺少整个中区或其一部分的tau蛋白片段。另外，越来越多的研究表明细胞外tau蛋白的一级结构是高度异质的(参见，1997年Johnson等人、2013年Meredith等人、2015年Kanmert等人2015和2018年Guix等人的报道)。

最新的研究揭示在人血浆中可检测到少量的tau蛋白(参见，Yanamandra K等人，Anti-tau antibody administration increases plasma tau in transgenic mice andpatients with tauopathy.Sci Transl Med 2017；9(386))。有些研究还揭示特定类型的血浆tau蛋白在AD中可能增加，但是由于研究时群体不同，这些研究的结果之间相互矛盾(参见，Mattsson N等人，Plasma tau in Alzheimer disease.Neurology 2016；87(17):1827-35)。

发明内容

发明人开发了一套灵敏且充分验证的tau蛋白免疫分析系统，利用该系统能够检测在血液中发现的各种tau蛋白片段。发明人在分析不同预先分类的诊断群组后，发现在用于研究的样品库和用于确认的样品库中血液NT1能够使AD和AD-MCI与正常对照实现良好区分。这些结果表明NT1分析可用作基于血液筛查AD的方法。至少部分地基于此完成了本发明。具体地，本发明包括以下内容。

本发明的第一方面，提供一种检测受试者中轻度认知障碍MCI和/或阿尔茨海默病AD的方法，其包括：

(1)利用试剂测量从所述受试者采集的血液样品中的tau蛋白N端片段的含量得到测量值的步骤；

(2)将所述测量值与标准值进行比较的步骤；

(3)当所述测量值高于所述标准值时，则将所述受试者检测为患有轻度认知障碍MCI和/或阿尔茨海默病AD，或者将所述受试者预测为患有轻度认知障碍MCI和/或阿尔茨海默病AD的风险。

优选地，所述tau蛋白N端片段包括tau蛋白全长序列中的第6-198位之间的序列，优选第6-18位之间的序列。

优选地，所述标准值为从与所述受试者的年龄相当的正常对象的血液样品经相同的方法获得的值。