[发明专利]一种食品食用菌中荧光增白剂的液质检测方法

权利要求书

1.一种食品食用菌中荧光增白剂的液质检测方法，用于检测食品中食用菌的10种荧光增白剂：FWA135、FWA140、FWA162、FWA184、FWA185、FWA199、FWA367、FWA368、FWA378和FWA393；其特征在于，具体包括以下步骤：

(1)10种荧光增白剂标准曲线的建立

A1标准储备液配制：分别称取FWA135、FWA140、FWA162、FWA184、FWA185、FWA199、FWA367、FWA368、FWA378和FWA393 10种荧光增白剂标准品至不同棕色容量瓶中，加入三氯甲烷溶剂配制成质量浓度为1mg/mL的标准储备液，2～8℃避光保存；

A2混合标准工作液配制：准确吸取适量的FWA135、FWA140、FWA162、FWA184、FWA185、FWA199、FWA367、FWA368、FWA378和FWA393标准储备液于容量瓶中，用乙腈定容，相应配制为荧光增白剂浓度为320ug/mL的混合标准工作液；

A3标准曲线建立：将混合标准工作液注入高效液相色谱-串联三重四极杆质谱仪进行检测，得到10种荧光增白剂的标准曲线；其中，检测条件如下：

色谱条件：色谱柱为Phenomenex Kinetex C18，其规格为100mm×2.1mm，2.6μm；流动相A为乙腈溶剂；流动相B为甲酸溶液；梯度洗脱程序为：0～1min,10％A；1～10min,10～80％A；10～15min,80～90％A；15～18min,90～10％A；18～20min,10％A；

质谱条件：电喷雾离子源；离子源温度为550℃；正离子扫描；多反应监测模式检测；雾化气流量为50L/h；加热辅助气流量为50L/h；气帘气流量为30L/h；电喷雾电压为5500V；

FWA135的去簇电压为100V，碰撞能量为44eV；

FWA140的去簇电压为140V，碰撞能量为44eV；

FWA162的去簇电压为90V，碰撞能量为53eV；

FWA184的去簇电压为70V，碰撞能量为81eV；

FWA185的去簇电压为70V，碰撞能量为49eV；

FWA199的去簇电压为250V，碰撞能量为35eV；

FWA367的去簇电压为60V，碰撞能量为54eV；

FWA368的去簇电压为135V，碰撞能量为45eV；

FWA378的去簇电压为150V，碰撞能量为30eV；

FWA393的去簇电压为150V，碰撞能量为42eV；

(2)食品食用菌类样品中10种荧光增白剂的含量测定

B1食品食用菌类样品预处理：按照质量比1:1的比例，称取NaCl和粉碎后食品食用菌类样品混匀，得到混合试样；

B2萃取溶剂配制：按照体积比为95～98:5～2的比例，量取乙腈溶液与甲酸溶液混匀，得到萃取溶剂；

B3荧光增白剂的萃取与吸附：称取适量混合试样，按照比例，在每克混合试样中加入2.5～4mL萃取溶剂，旋涡震荡5～10min，后在4℃15000r/min离心10min，将上层清液转移至提前放有600～800mg吸附剂的离心管中，旋涡震荡5～10min后，在5℃15000r/min离心10min，再将上层清液转移至离心管中，于40～45℃平衡定量浓缩仪中浓缩至干；然后在残留物中加入2mL乙腈旋涡溶解，过0.2μm滤膜得到萃取净化后的待检测样品溶液；

B4荧光增白剂的液质检测：将待检测样品溶液注入高效液相色谱-串联三重四极杆质谱仪，采用与步骤A3相同的检测条件进行检测，根据步骤(1)建立的标准曲线得到待检测样品溶液中10种荧光增白剂的含量。

2.根据权利要求1所述食品食用菌中荧光增白剂的液质检测方法，其特征在于：步骤A3中流动相B为质量浓度为0.1％甲酸溶液。

3.根据权利要求1所述食品食用菌中荧光增白剂的液质检测方法，其特征在于：步骤A3中色谱柱的柱温为40℃。

4.根据权利要求1所述食品中荧光增白剂的液质检测方法，其特征在于：步骤A3中流动相A和B的流速为0.5mL/min。