[发明专利]一种药敏试验采样器及药敏试验方法

说明书

本发明公开一种药敏试验集采样器及药敏试验方法，包含专用的采样器，采样器容积约5mL，内盛装液体培养基1‑2mL,直径9cm的一次性平皿盛装的固体培养基1块，药敏试纸板1块。使用方法如下，用无菌的一次性采样器吸取动物活体或尸体的肝脏组织或病变组织，摇动采样器将组织与液体培养基混合恒温箱培养8‑12h，然后用采样器将培养物滴加到固体培养基表面，静置3‑10min，待培养基表面液体被吸干，再在培养基表面覆盖药敏试纸板，恒温培养箱培养12‑24h，根据抑菌圈的大小判定病料病原对药物的敏感性，指导临床选药和用药。本发明的简化了药敏试验操作过程和步骤，可在24小时内完成对细菌的抗菌药物筛选。更为重要的是降低了药敏试验对试验环境和操作人员的要求。

技术领域

本发明涉及抗菌检测技术领域，尤其涉及药敏试验采样器及药敏试验方法。

背景技术

在动物养殖产业中，尤其是随着集约化养殖程度的提高，各种细菌性疾病给养殖业造成的经济损失备受重视，因此使用抗生素防治细菌性疾病成为常态。但由于从业者的素质参差不齐，在养殖过程中存在大量不科学、盲目滥用抗生素的现象。造成很多致病性细菌产生了耐药性，导致抗菌药对细菌性疾病的控制效果越来越差，结果造成药物浪费，而且还延误病情，使死亡率升高，给养殖户带来很大的经济损失。同时，大量使用抗生素产生的耐药菌株还可能将耐药性基因由动物转移给人类，对人类健康造成潜在威胁，而抗生素药物在动物体内的蓄积与残留，导致食品安全问题，直接威胁到人类健康。

为了保证动物性食品安全，国内外提倡无抗养殖。如何避免滥用抗生素，科学地使用药物，药敏试验在临床诊断中的应用就显得非常重要。药敏试验旨在了解病原微生物对各种抗生素的敏感(或耐受)程度，以指导临床合理选用抗生素药物的微生物学试验。利用药敏实验不仅可以相对快速有效地检测病原菌对各种抗菌药的敏感性，及时了解养殖场内病原微生物的耐药情况，更重要的是指导临床科学合理用药，避免盲目用药，养殖户可根据药敏试验结果自主的灵活选药，可以就地选出最经济有效的敏感药物，既能缩短病程，又能减少费用。

药敏实验有多种方法，其中纸片扩散法在临床上最常用。纸片扩散法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的固体培养基表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，在纸片的周围形成一种浓度梯度。而测试菌在纸片周围抑菌浓度范围内的培养基上不生长，在抑菌范围外的生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小可反映测试菌对测定药物的敏感程度，抑菌圈越大说明测试菌对该药越敏感，该药对测试菌的最低抑菌浓度越小，临床上使用该药的效果可能更好。

目前，药敏实验需要专门的实验环境、专业的设备和专业的技术培训。且存在以下三个缺点：1，周期长，药敏试验前必须完成病原微生物的分离鉴定，至少需要2天甚至数周；2.试验条件苛刻，一般要在“超净台”中用接种环进行划线接种。一般的养殖场和普通养殖户无法完成药敏实验，必须由专业人士实施。从采集样品到完成药敏实验至少需要2天，饲养员不能第一时间获得病原微生物对药物敏感性的结果，处于被动状态。3.试验对象种类非常有限，基本上是实验人员主观判断和挑选的微生物菌落，往往是病料中数量最多微生物种类，这可能会导致忽视病料中其他的微生物，尤其是在存在混合感染的病例中，而其他被忽视的微生物有可能疾病的原因所在。实际操作中即使省去鉴定病原微生物，从病原微生物分离到获得药敏试验结果也需要2～4天，且必须具备严苛的试验条件。而定期进行药敏试验有助于了解当地细菌对抗菌药的敏感性情况，现急需步骤简单，试验条件简单的药敏试验方法。专利CN1556217A虽然建立了一种“快速筛选病原微生物敏感药物的方法”，但不能避免“少量杂菌”污染，同时该方法提及的样本采取时需要一定的专业培训，如简单的无菌操作技术。

发明内容

为了克服现有的药敏试验对实验条件的限制，本发明的目的在于提供一种药敏试验采样器，改进药敏试验的取样方法，简化药敏试验的苛刻操作条件，提高药敏试验选药的准确性。