[发明专利]利用天花粉制备葫芦苦素和多糖的方法在审
申请号: | 201811536998.1 | 申请日: | 2018-12-14 |
公开(公告)号: | CN109627278A | 公开(公告)日: | 2019-04-16 |
发明(设计)人: | 向华 | 申请(专利权)人: | 长沙湘资生物科技有限公司 |
主分类号: | C07J9/00 | 分类号: | C07J9/00;C08B37/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 410126 湖南省长沙市芙蓉区隆*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 洗脱液 过滤 天花粉 滤渣 葫芦 上清液 石油醚 乙醇 洗脱 葡聚糖凝胶 天花粉多糖 三氯乙酸 石油醚萃 乙醇溶液 水溶解 糖化酶 醇沉 绞碎 浸提 酶解 洗净 制备 生产 | ||
1.利用天花粉生产葫芦苦素和多糖的的方法,其具体步骤如下:
(1)将天花粉进行洗净、绞碎,加入糖化酶,使溶液中酶活力达到100U/L以上,50~70℃酶解1.5~3h;
(2)加入水在90~100℃浸提1.5~3h,过滤得滤渣Ⅰ和滤液Ⅰ,其中加入水的量L与天花粉重量kg比为4~8:1;
(3)将滤液Ⅰ在50~60℃减压浓缩至1/20~1/40,向其中加入两至四倍体积的石油醚后搅拌萃取30~60min,再静置8~12h,得水相和石油醚相;
(4)向水相中加入乙醇,使溶液含乙醇达到60~80%,在4~8℃下进行醇沉过夜,过滤得滤渣Ⅱ;
(5)将石油醚相在50~60℃减压浓缩至1/10~1/20,上AB-8柱,用四至六倍柱体积的70%乙醇溶液进行洗脱,得洗脱液Ⅰ;
(6)将洗脱液Ⅰ在50~60℃减压浓缩至1/15~1/30,在4~8℃下过夜结晶,过滤得葫芦苦素产品;
(7)向滤渣Ⅱ中加入水溶解,再加入终浓度为10%三氯乙酸,6000~8000rpm离心30~60min得上清液,其中加入水的量L与滤渣Ⅱ重量kg比为1.5~2.5:1;
(8)将上清液上葡聚糖凝胶G-100柱,直接用八至十倍柱体积的水进行洗脱,得洗脱液Ⅱ;
(9)将洗脱液Ⅱ在50~60℃减压浓缩至1/15~1/30,在4~8℃下加入乙醇至终浓度为60~80%,过夜结晶,过滤,直接冷冻干燥得天花粉多糖。
2.根据权利要求1的方法,所述过滤为陶瓷膜过滤1次,膜孔径在0.2~0.3微米之间。
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