[发明专利]HPLC检测管萼山豆根中4种生物碱含量的方法

说明书

本发明建立HPLC法同时测定管萼山豆根中苦参碱，金雀花碱、氧化苦参碱、N‑甲酰基金雀花碱4种生物碱的方法，采用Boston Green ODS PC₁₈(4.6*250mm,5μm)柱，乙腈‑0.2％磷酸(含0.01％三乙胺)为流动相，流速0.8mL/min，检测波长220nm，柱温30℃。建立的HPLC方法简便、快速，重现性良好，适合该药材生物碱的定量测定，为药材选择与质量控制提供一种简单有效的方法。

所属技术领域

本发明涉及一种HPLC检测管萼山豆根中4种生物碱含量的方法，属于检测技术领域。

背景技术

管萼山豆根(Euchresta tubulosa Dunn)是豆科山豆根属植物，又名鄂豆根、胡豆莲、豆根、鸦片七(湘西地区)，民间习用根茎，利咽喉，治腹胀、腹痛，主要产自湖北西北、湖南、四川。山豆根属植物性苦寒，具有较强的清热、镇痛、消炎和抗癌等作用，对治疗咽喉痛、牙痛、胃腹痛、毒虫咬伤等有良好疗效。在武陵山区的土家族将管萼山豆根誉“信誉极高的民族药”，同属植物山豆根(E.japonica Hook.f.ex Regel)在日本民间用于抗癌、抗心律不齐、消炎和治疗溃疡。尹玉琴等研究发现，管萼山豆根总生物碱也具有镇静、镇痛及降温等中枢系统抑制作用，目前尚未见有关管萼山豆根中生物碱类化合物的含量测定报道，我们已经从管萼山豆根茎中分离得到苦参碱，金雀花碱、氧化苦参碱、N-甲酰基金雀花碱。

发明内容

本发明通过建立HPLC法同时测定4种生物碱的含量，为今后该药材及同属药材选择和评价提供依据。

一种HPLC检测管萼山豆根中4种生物碱含量的方法，包括以下步骤：

(1)生物碱提取：管萼山豆根根、茎、叶于50℃烘干后粉碎,过30目筛，加入纯净水，其中加入水量L与管萼山豆根重量kg比1:25-350，超声20-40min后，75-85℃回流提取2h，提取后滤纸过滤1次，加水定容至1500mL，作为生物碱样品溶液；

(2)HPLC检测：色谱柱为Boston Green ODS PC18(4.6*250mm，5μm)柱，流动相为乙腈-0.2％磷酸水溶液，流速0.8mL/min，柱温30℃，检测波长220nm，进样量10μL，其中乙腈与0.2％磷酸水溶液的体积L比为0.04:0.76。

所述0.2％磷酸水溶液中优选含有0.01％三乙胺的0.2％磷酸水溶液。

技术效果

1、本发明方法可以快速检测管萼山豆根根、茎、叶中苦参碱，金雀花碱、氧化苦参碱、 N-甲酰基金雀花碱这四种生物碱。

2、节省时间、提高效率，为今后该药材及同属药材选择和评价提供依据。

附图说明

图1对照品及样品HPLC：a—对照品图谱；b—样品图谱(茎的水提物)；0溶剂峰，1金雀花碱，2苦参碱，3氧化苦参碱，4N-甲酰基金雀花碱；

图2苦参碱的含量对比图；

图3氧化苦参碱的含量对比图；

图4金雀花碱的含量对比图；

图5 N-甲酰基-金雀花碱的含量对比图；

图6管萼山豆根根、茎、叶中几种生物碱的含量对比图。

具体实施方式

下面，本发明将用实施例进行进一步的说明，但是它并不限于这些实施例的任一个或类似实例。

实施例1