[发明专利]一种用于硒蛋白检测的荧光探针化合物及其制备方法

说明书

本发明涉及一种用于硒蛋白检测的荧光探针化合物，所述化合物结构如式Ⅰ所示。与传统检测技术相比，非侵入性的荧光探针检测操作简单、方便、快速，灵敏度高，选择性好，响应时间短，可对检测目标物进行原位、实时监测，且应用范围广泛。式Ⅰ。

技术领域

本发明属于高等有机合成领域，具体涉及一种用于硒蛋白检测的荧光探针化合物及其制备方法。

背景技术

硒蛋白是细胞内重要的抗氧化物种，可以保护细胞免受氧化损伤。活性硒物种抗氧化机制通过乒乓机制直接清除ROS。机体中的活性硒物种主要以含硒氨基酸形式存在，如硒代半胱氨酸（CysSeH，Sec）、硒代谷胱甘肽（GSeH）、硒代过硫化半胱氨酸（CysSSeH）、硒代过硫化谷胱甘肽（GSSeH）、硒-甲基硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸等，它们通常被结合到蛋白质中作为谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）和硫氧还蛋白还原酶（Trx）的活性位点。在人体中至少有 25 种不同的硒蛋白（SePs），这些硒蛋白具有广泛的生理功能。机体缺少硒会导致免疫功能低下和患癌症风险增高。但过量补充硒物质会导致Ⅱ型糖尿病的风险增高，甚至导致急性或慢性硒中毒，因为高浓度的 RSeS可以通过电荷转移到氧气来增强细胞内超氧阴离子的含量。因此，适当的RSeS供给对健康至关重要。

由于硒蛋白在生物体内重要的生物医学意义，用于检测硒蛋白浓度水平变化的分析方法非常重要。目前，检测方法需要样品的预处理，需要复杂的操作手段及大型仪器。因此，寻找一种方便快捷检测方法迫在眉睫。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明提供一种方便快捷的用于硒蛋白检测的荧光探针化合物。

本发明涉及一种用于硒蛋白检测的荧光探针化合物，所述化合物结构如式Ⅰ所示：

式Ⅰ。

本发明还提供一种用于硒蛋白检测的荧光探针化合物的制备方法，步骤包括：

（1）将6-溴-2-萘酚在催化作用下与甲胺盐酸盐反应，使得羟基转化甲氨基，得到化合物一；

化合物一

（2）再将化合物一与CuCN反应生成氰基，得到化合物二；

化合物二

（3）将化合物二与二异丁基氢化铝反应，使得氰基转化为醛基，得到化合物三；

化合物三

（4）将2，3，3-三甲基-3H-吲哚（24.8g，0.156mol），碘乙烷反应后，合成半花菁，即化合物四；

化合物四

（5）将化合物三与化合物四反应，合成荧光团，即化合物五；

化合物五

（6）将化合物五和三光气、N,N-二异丙基乙胺反应；再加入无水二氯甲烷，N,N-二异丙基乙胺，4-二甲氨基吡啶，2,2'-二硫代二乙醇反应，得到如式Ⅰ的黄色产物。

本发明还提供一种双光子荧光探针，如上述的化合物作为检测硒蛋白的双光子荧光探针。

有益效果：与传统检测技术相比，非侵入性的荧光探针检测操作简单、方便、快速，灵敏度高，选择性好，响应时间短，可对检测目标物进行原位、实时监测，且应用范围广泛。

附图说明

图1为本发明试验例1中采用的荧光探针对硒蛋白检测前的荧光变化。