[发明专利]一种抗人Tim3单克隆抗体及其应用

说明书

本发明公开了一种抗人Tim3单克隆抗体及其应用。本发明公开的抗人Tim3单克隆抗体，含有重链可变区V_H和轻链可变区V_L，V_H和V_L均由决定簇互补区和框架区组成；V_H和V_L的决定簇互补区均由CDR1、CDR2和CDR3组成；V_H的CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列为序列3的第31‑35位、第50‑66位和第99‑109位；V_L的CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列为序列4的第24‑34位、第50‑56位和第89‑97位。本发明提供的抗人Tim3单克隆抗体与Tim3亲和力高，特异性强，对于多种Tim3表达失调相关性疾病的治疗与预后具有重要意义。

技术领域

本发明属于生物技术和医学领域，涉及一种Tim3单克隆抗体HKT8，还涉及该单克隆抗体的制备以及诊断和治疗Tim3高表达所导致疾病中的应用。

背景技术

Tim3属于T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域(T Cell immunoglobulin domainand mucin domain containing molecules family,Tim)家族成员，最初发现于克隆哮喘小鼠模型中，小鼠Tim家族包括8个成员，人体中3个成员(Tim1、Tim3和Tim4)定位于人类染色体5q33.2，其中Tim3包含301个氨基酸，在免疫调节中起重要作用，主要表达在活化的CD4+T细胞、已分化的Th1细胞和CD8+T细胞表面，在Th17细胞、Treg细胞、NK细胞和其他淋巴细胞亚群也发现了它的表达。

Tim3是一种负性调节分子，通过影响免疫细胞活性对免疫系统进行调节。一方面，主要表现为在急性感染、超敏反应和自身免疫中对机体起保护作用。研究发现在自身免疫疾病如系统性红斑狼疮中，Tim3异常表达，抑制Th1细胞功能，免疫系统失衡，Th2细胞活性增强，导致疾病发生。因此，阻断Tim3的作用通路则有利于恢复机体免疫平衡，缓解疾病。

另一方面，半乳凝素-9(Galectin-9，Gal-9)为Tim3的天然配体，广泛表达于外周免疫系统。Gal-9能与Th1、Th17细胞上的Tim3分子特异性结合，显著抑制T细胞的活化和增殖、诱导Th1细胞的凋亡，下调免疫反应，诱导免疫耐受。因而，Tim3高表达，在肿瘤免疫、免疫抑制中则可能促进疾病的发生发展。如在HCV感染患者及肿瘤患者体内，T细胞上Tim3表达水平升高，进而诱导T细胞凋亡，负向调节机体免疫功能。此外Tim3的高表达往往提示预后不良。因此，阻断Tim3与其配体结合，可以保护Th1、Th17细胞免于凋亡，增强T细胞活性，恢复机体免疫功能。

研究证实Tim3在多种疾病的发生发展、免疫逃逸和疾病临床预后关系密切，Tim3也逐渐成为疾病治疗靶点及预后的重要免疫检查点之一。尤其在肿瘤治疗中，阻断Tim3信号通路的负调控，激活免疫系统，促进T细胞相关的肿瘤特异性细胞免疫，提供了一种新的突破性的肿瘤治疗方法，即肿瘤免疫疗法。免疫检查点是肿瘤免疫疗法中正负调控免疫系统平衡的关键，癌细胞可借助免疫检查点抑制免疫系统，规避免疫监视。因此，免疫检查点抑制药具有高效治疗肿瘤的潜力，给肿瘤治疗带来希望。

Tim3作为一种重要的免疫检查点，具有极大的研究意义，然而目前还没有较好的、排异性小、抗体效价高的Tim3抗体应用于肿瘤免疫疗法、自身免疫性疾病或感染性疾病等的治疗以及相关药物的制备。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服目前Tim3抗体的排异性小、抗体亲和力高问题。

为解决上述技术问题，本发明首先提供了一种抗Tim3抗体，所述抗Tim3抗体含有重链可变区V_H和轻链可变区V_L，所述V_H和V_L均由决定簇互补区和框架区组成；

所述V_H和所述V_L的决定簇互补区均由CDR1、CDR2和CDR3组成；