[发明专利]以中华鳖冬眠血清为基础的中华鳖精子低温稀释液

说明书

本发明公开了一种以中华鳖冬眠血清为基础的中华鳖精子低温稀释液，所述低温稀释液为每1L稀释液中含有中华鳖冬眠血清40mL，离心后备用的卵黄液15‑25mL，聚乙烯醇1.0‑2.0g，三羧甲基氨基甲烷4.5‑6.5g，NaCl 9.6‑66.0g，CaCl₂ 0.168‑1.0g，KCl 0.48‑1.5g，NaHCO₃ 0.42‑3.0g，MgSO₄·7H₂O 0‑0.274g，Na₂HPO₄·H₂O 0‑0.208g，KH₂PO₄ 0‑0.072g，C₆H₁₂O₆·H₂O 0‑1.2g。本发明得到的以中华鳖冬眠血清为基础的中华鳖精子低温稀释液，其通过加入中华鳖冬眠血清，从而将中华鳖精子在保存14天后，精子的活力在50‑60%。

技术领域

本发明涉及一种精子稀释液，特别是以中华鳖冬眠血清为基础的中华鳖精子低温稀释液。

背景技术

精子体外保存技术的发展有着广阔的经济价值和社会效益。特别是在养殖业方面，精子体外保存为养殖业的发展和创新提供了坚实的基础和条件，有利于优秀遗传基因的推广。此外，这还解决了由于雌雄个体性腺不同步或地理分布不同产生的生殖隔离导致人工繁殖困难这一问题，为杂交育种、新品种培育、预防种质退化提供了新的技术途径。另外，该技术也为保护生物多样性开辟了新途径。随着人工授精应用范围的逐渐扩大，面对种类繁多且效果不一的稀释液配方，有必要开发出一种中华鳖专属的精液稀释液。

发明内容

本发明的目的是为了解决上述现有技术的不足而提供一种以中华鳖冬眠血清为基础的中华鳖精子低温稀释液，从而延长中华鳖精子的保存时间。

为了实现上述目的，本发明所设计的一种以中华鳖冬眠血清为基础的中华鳖精子低温稀释液，所述低温稀释液包括中华鳖冬眠血清、中华鳖卵黄液、缓冲盐类。

所述低温稀释液为每1L稀释液中含有中华鳖冬眠血清40mL，离心后备用的卵黄液15-25mL，聚乙烯醇1.0-2.0g，三羧甲基氨基甲烷4.5-6.5g，NaCl 9.6-66.0g，CaCl₂ 0.168-1.0g，KCl 0.48-1.5g，NaHCO₃ 0.42-3.0g，MgSO₄·7H₂O 0-0.274g，Na₂HPO₄·H₂O 0-0.208g，KH₂PO₄ 0-0.072g，C₆H₁₂O₆·H₂O 0-1.2g；其配置方法是将上述原材料经搅拌后溶解在水溶液中即可，需在无菌下操作并于0℃保存。

所述中华鳖冬眠血清的制备方法是待中华鳖冬眠后，抽血获得中华鳖冬眠血清，超低温冷冻，待用；当需要使用时，将中华鳖冬眠血清在4℃解冻，解冻后4℃离心，去沉淀后留上清，用0.22μm膜无菌过滤即可。

作为优选，所述低温稀释液为每1L稀释液中含有中华鳖冬眠血清40mL 、离心后备用的卵黄液15mL、聚乙烯醇1.0g、三羧甲基氨基甲烷4.5g、NaCl 66.0g，CaCl₂ 1.0g，KCl1.5g，NaHCO₃ 3.0g。