[发明专利]一种玉米×水稻远缘杂交育成双单倍体的方法

权利要求书

1.一种玉米×水稻远缘杂交育成双单倍体的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)玉米雌穗套袋：选健康无病害的玉米植株，在花丝抽出前，将羊皮袋套在雌穗上，待花丝抽出；

(2)稻穗花粉收集：水稻抽穗后开花前，每穗剪去基部幼嫩小穗，保留中上部小穗，用牛皮袋套住小穗，扎紧袋口，0.5～2h后，将套袋的稻穗轻轻弯下，轻拍纸袋，使花粉落入袋内，再次轻拍纸袋，使袋内花粉集中于口袋中间，取下牛皮袋，得水稻花粉，备用；

(3)玉米与水稻杂交：步骤(1)花丝抽出第2～4天时开始进行授粉，具体的授粉方法为：先取掉套在雌穗上的羊皮袋，将玉米雌穗上长出的花丝剪短，再用装有营养液的刷子将营养液边注射边涂抹到剪短的花丝上，接着将步骤(2)收集的水稻花粉均匀撒到花丝上，最后用羊皮袋套住雌穗，并用大头针将羊皮袋固定在玉米雌穗上，授粉完成；

(4)染色体加倍：授粉1～3d后，拿掉玉米雌穗上的羊皮袋，剥开雌穗苞叶，用解剖刀将雌穗上的种皮刮破，在子房上部1/3～1/2处，找到胚珠，用无菌针刺穿胚珠壁后，将吸取了染色体加倍液的无菌棉花塞入胚珠中，重新套上羊皮袋，继续管理至种子成熟，收获种子。

2.根据权利要求1所述的一种玉米×水稻远缘杂交育成双单倍体的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述雌穗上长出的花丝用剪刀剪短至长度为0.5～2cm。

3.根据权利要求1所述的一种玉米×水稻远缘杂交育成双单倍体的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述刷子的制作方法为：选取2～3ml标有刻度的注射器，用强力胶将长为4～5cm的软毛固定在针筒口周围。

4.根据权利要求1所述的一种玉米×水稻远缘杂交育成双单倍体的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述营养液主要包括如下成分：松针粉2～6g/L、魔芋粉5～8g/L、红糖20～30g/L、6-苄氨基腺嘌呤12～15mg/L和赤霉素5～10mg/L。

5.根据权利要求1所述的一种玉米×水稻远缘杂交育成双单倍体的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述刷子内装的营养液体积为1～2ml。

6.根据权利要求1所述的一种玉米×水稻远缘杂交育成双单倍体的方法，其特征在于，步骤(4)中，所述染色体加倍液主要包括如下成分：甲基胺草磷1.5～3mg/L、氨磺灵69～104mg/L和2,4-二氯苯氧乙酸25～35mg/L。

7.根据权利要求1所述的一种玉米×水稻远缘杂交育成双单倍体的方法，其特征在于，步骤(4)中，所述无菌棉花吸取染色体加倍液的体积为10～20μl。