[发明专利]一株产乳酸的解淀粉芽孢杆菌及其应用

说明书

本发明提供了一种解淀粉芽孢杆菌是（Bacillus amyloliquefaciens）RS‑1，该菌株已于2011年12月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.5591。并提供了该菌株在秸秆发酵制取动物饲料领域的应用。试验表明，解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）RS‑1 CGMCC No.5591是一株产酸能力高、应用效果明显、适用性强的产芽孢细菌菌株。

技术领域

本发明涉及一株解淀粉芽孢杆菌及其应用，尤其涉及一株能够产乳酸的解淀粉芽孢杆菌及其在秸秆发酵制取动物饲料领域中的应用。

背景技术

乳酸菌是指能从葡萄糖或乳糖的发酵过程中产生乳酸的细菌。乳酸菌（LAB）根据发酵类型可分为：同型发酵LAB（Homolactic，^hoLAB）和异型发酵LAB（Heterolactic，^heLAB），^hoLAB发酵葡萄糖只产生乳酸的LAB；^heLAB发酵葡萄糖产生多种发酵产物。从理论上来说，只产生乳酸的菌株更受欢迎，因为1mol/L葡萄糖通过糖酵解（EMP）途径，产生2 mol/L丙酮酸，然后丙酮酸转化为2 mol/L乳酸和2 mol/L的腺嘌呤核苷三磷酸（ATP），减少了能量和干物质的损失，这同其他发酵类型相比大大降低了能量的消耗。^heLAB产生多种代谢产物，如乳酸、乙酸、乙醇、CO₂。由于^heLAB菌株缺乏2-磷酸果糖醛缩酶，6-磷酸葡萄糖只能通过6-磷酸葡萄酸被代谢，而不能被转化成6-磷酸果糖，在此过程中1分子葡萄糖代谢只产生1分子乳酸，1 分子乙醇，以及1分子CO₂，这就表明有大量的碳源以CO₂的形式损失。

乳酸菌在畜牧业领域应用广泛，可以作为青贮饲料的添加剂。在自然界中，植物上所附着的乳酸菌数量通常较少。因此，可加入能迅速增殖的^hoLAB来主导青贮发酵。Wieringa和Beck认为，青贮添加剂中的菌株必须是能战胜作物本身所附着的各种菌群，且为^hoLAB；同时这些菌株必须具有耐酸性，在青贮中可以迅速繁殖，使青贮酸性快速下降，它们必须可以广泛的利用各种可溶性糖，不应降解有机酸，在较大的温度范围及多种条件下均可生长，且不具有过度的蛋白质水解酶活性。

乳酸菌的另一个应用是有些乳酸菌可以利用果聚糖作为碳水化合物来源。果聚糖是牧草中一种主要的可溶性碳水化合物（WSC），是一种果糖聚合物， 在温带牧草中果聚糖的含量约占WSC的90 %。但是植物中所附着的LAB对果聚糖的降解利用非常低。因此筛选并培养具有高含量果聚糖水解酶的菌株加入青贮中，可以加速发酵进程，尤其在碳水化合物供应相对较弱的初始发酵阶段，增加LAB生长所需的发酵底物，使青贮pH迅速下降，抑制酵母菌、丁酸菌等不利于青贮保藏的微生物的生长。

目前在微贮过程中使用的乳酸菌为乳酸肠球菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、乳酸乳杆菌、植物乳杆菌、乳酸片球菌等，这些菌株均不产生芽孢，菌剂均使用菌体，所以活性保存期短，一般不超过半年，甚至更短，严重影响其使用效率。

发明内容

本发明的目的是提供一株能够产乳酸的解淀粉芽孢杆菌。

本发明所提供的解淀粉芽孢杆菌是（Bacillus amyloliquefaciens）RS-1，该菌株已于2011年12月14日 保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.5591。

解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）RS-1 CGMCC No.5591的基因组DNA具有如下特异序列：