[发明专利]一种基于氮杂环结构的溶酶体靶向型荧光染料及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于氮杂环结构的溶酶体靶向型荧光染料，其特征在于：

所述溶酶体靶向型荧光染料是以5-(二甲氨基)萘-1-磺酸或7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑作为荧光母体，在母体分子结构上引入不同种类的氮杂环取代基。

2.根据权利要求1所述的基于氮杂环结构的溶酶体靶向型荧光染料，其特征在于其结构如下所示：

其中R选自如下基团中的一种：

R₁为氢或C_1-5的烷基，R₁可以相同或不同。

3.一种权利要求1或2所述的基于氮杂环结构的溶酶体靶向型荧光染料的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

将氮杂环类化合物和碱溶于有机溶剂中，室温下搅拌反应30-90min，然后将溶有化合物DS-Cl或NBD-Cl的溶液缓慢滴加到反应体系中，并于室温下继续搅拌反应2-24h；待反应液冷却后抽滤，洗涤，得粗产品，纯化后得到目标产物；

所述化合物DS-Cl、NBD-Cl的结构式如下：

所述氮杂环类化合物为如下结构化合物中的一种：

其中R₁为氢或C_1-5的烷基等，R₁可以相同或不同。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：

所述碱为碳酸钾、三乙胺或4-N,N-二甲基吡啶。

5.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于：

所述化合物DS-Cl或NBD-Cl、氮杂环类化合物和碱三者之间的摩尔比为1:1:1-1:4:4。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：

所述有机溶剂为二氯甲烷或三氯甲烷。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：

所述纯化是采用硅胶柱色谱分离的方法进行纯化，洗脱剂由二氯甲烷和甲醇按体积比1:1-150:1的比例混合构成。

8.一种权利要求1或2所述的基于氮杂环结构的溶酶体靶向型荧光染料的应用，其特征在于：所述溶酶体靶向型荧光染料能够特异性靶向细胞的溶酶体，并能长时间标记细胞的溶酶体，可用于监测细胞内溶酶体的自噬过程。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：

所述细胞包括正常细胞、肿瘤细胞或小鼠巨噬细胞等。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：

所述细胞包括子宫颈癌细胞HeLa、人肾上皮细胞293T、人正常乳腺上皮细胞MCF-10A、小鼠巨噬细胞Raw264.7、人正常肝细胞QSG-7701等。