[发明专利]一种PEI功能化绿色荧光碳点制备方法及基于该碳点的凝血酶检测方法

权利要求书

1.一种PEI功能化绿色荧光碳点制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)、按质量比1:5～4:1将苹果酸和PEI溶于超纯水中，搅拌均匀后置于反应釜中，在120～220℃条件下水热反应3～12h，得到棕黄色溶液；

(2)、将步骤(1)得到的棕黄色溶液经过抽滤，除去大颗粒杂质，滤液经真空干燥，得到固体粉末；

(3)、向步骤(2)得到的固体粉末中加入无水乙醇，超声后并离心，除去上清液、沉淀冷冻干燥得到纯化的碳点；离心转速为13000rpm-16000rpm，离心时间为10-30min。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中抽滤滤膜孔径为0.22μm。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中真空干燥温度为50℃。

4.一种基于权利要求1制备的绿色荧光碳点的凝血酶检测方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)、荧光淬灭：将凝血酶适配体加入到碳点分散液中，即制备成检测凝血酶的P-CDs-适配体传感器；适配体能淬灭正电荷碳点(P-CDs)荧光；正电荷碳点(P-CDs)与凝血酶适配体在磷酸盐缓冲液混合，磷酸盐缓冲液中磷酸盐溶液浓度为10mM、NaCl浓度为100mM；Mg²⁺浓度为4mM、凝血酶浓度为1～200nM；

(2)、凝血酶的检测：加入凝血酶，适配体结合凝血酶后，正电荷碳点(P-CDs)的荧光得以恢复，根据荧光恢复强度的变化，实现对凝血酶的检测。

5.根据权利要求4所述的凝血酶检测方法，其特征在于：所述步骤(2)中，通过在EP管中依次加入正电荷碳点(P-CDs)、凝血酶适配体、NaCl、MgCl₂、磷酸盐缓冲溶液，反应30min后，再加入凝血酶溶液，孵育一段时间，孵育后的溶液进行荧光强度测定。

6.根据权利要求5所述的凝血酶检测方法，其特征在于：所述孵育时间为40min。