[发明专利]一种鉴定评价水稻穗颈瘟抗性的方法

说明书

本发明的一种鉴定评价水稻穗颈瘟抗性的方法，利用生育期错开的诱发品种，单独接种多个单孢菌株，配合病圃已有田间菌株，使鉴定田块菌株丰富度提升的同时，使孢子释放持续时间增加，使生育期水稻品种在其整个抽穗成熟期，穗颈发病时孢子浓度足够且丰富，各个生育期不同的水稻品种能够同时播种鉴定。同时，本发明克服了直接注射品种方法发病过重以及自然发病方法导致的发病效果不稳定等缺点，可有效的作为水稻品种穗颈瘟抗性鉴定手段，为水稻亲本抗性筛选、水稻抗性育种及水稻抗性资源筛选等提供可靠方案。

技术领域

本发明涉及水稻病害鉴定方法，更具体地，涉及一种鉴定评价水稻穗颈瘟抗性的方法。

背景技术

水稻作为主要的粮食作物，每年由于病虫害损失巨大。稻瘟病是一种由稻瘟病菌Magnaporthe oryzae(无性世代：Pyricularia oryzae)引起的真菌性病害，广泛存在于世界各地，严重危害水稻、小麦等粮食作物生产安全。随着人口的逐渐增加以及耕地面积的逐渐减少，粮食产量增加面临巨大的压力。水稻稻瘟病是威胁水稻产量安全的一个重要瓶颈。稻瘟病的发生，常导致水稻产量大幅度减产。1980年，浙江省50％以上的产量损失由稻瘟病造成；1981年南方早稻稻瘟病，给福建、广东、江西省带来10亿斤稻谷损失。中国粮食大省黑龙江省，2001年、2005年和2006年爆发稻瘟病，发病严重地块的穗颈瘟率达70％以上，局部地块绝产。选育及推广抗性品种是防治稻瘟病最经济有效和最安全的措施(孙国昌等，2000)。近年来，生产上输送了大量优质高产高抗的水稻品种。然而抗性品种连续使用3-5年后，品种的抗性就会明显衰退，造成稻瘟病的突发和大面积爆发。这种衰退在新抗源无法持续发现的衬托下显得越发突出(Jia et al.，2009)。随着超级杂交水稻的发展，品种审定中稻瘟病抗性级别也成为限制性因素，稻瘟病的有效控制对保障我国的粮食安全具有重要意义。

稻瘟菌种群的变异性导致特异的小种可以不断产生。连续多年大面积种植具有相同或相近抗源的水稻品种会使得当地部分致病小种得到富集进而引起种群演替，致病小种的富集会增大抗性品种的感病几率，从而加速抗瘟性的丧失。大量研究表明，稻瘟菌的小种变异和种群演替是造成水稻抗性丧失的主要原因(孙国昌等，1992；柴荣耀等，1999；Liu etal.，2010)。通过抗性品种的合理布局与轮换，能够避免品种抗瘟性的快速衰退，缓解新抗源发掘的压力，延长当前主栽品种在生产中的抗病性寿命。

水稻品种在育成过程中，筛选鉴定水稻稻瘟病抗性是必要过程。稻瘟病抗性鉴定主要包括自然病圃鉴定和人工接种鉴定两种手段。根据水稻各生长时期分为叶苗瘟鉴定和穗颈瘟抗性鉴定。传统的自然病圃水稻稻瘟病抗性鉴定主要是在稻瘟病高发区进行苗期和成株期穗颈瘟鉴定，自然病圃受当地环境影响较大，且单一病圃受菌株生理小种局限性及单一年份不可重复性等因素影响，对鉴定结果影响非常大。人工接种鉴定非常必要，且越来越作为主要鉴定手段，但是直接接种于水稻品种特别是直接注射菌液接种与自然发病状态差异较大，比品种实际抗感表现严重，容易导致淘汰某些优良品种。

发明内容

本发明提供一种鉴定评价水稻穗颈瘟抗性的方法，以解决上现有水稻稻瘟病抗性鉴定不准确导致容易淘汰优良品种的技术问题。

根据本发明的一个方面，提供一种鉴定评价水稻穗颈瘟抗性的方法，包括以下步骤：

步骤S1，每年采集穗颈瘟标样，进行单孢分离，以获取并保存菌株；

步骤S2，对每年分离保存的菌种进行生理小种鉴定，以获取每个菌株的致病性；并基于每个菌株的致病性，按每个生理小种所占比例及对单基因系致病覆盖度选择10个产孢好的菌株进行培养，以获取孢子并保存；

步骤S3，选取常年湿度大，雾多、结露时间长的常发病稻区作为鉴定病圃，并选定至少两个生育期错开的发病率稳定且成熟期发病率高的品种作为诱发品种；

步骤S4，取步骤S2所获取的孢子配制浓度为5×104/ml孢子液，对步骤S3中诱发品种注射接种所述孢子液，且每株水稻接种2-3穗；