[发明专利]一种樟疫霉菌的检测靶标Pcin100006及其专用检测引物和快速检测方法有效
申请号: | 201811547749.2 | 申请日: | 2018-12-17 |
公开(公告)号: | CN109439792B | 公开(公告)日: | 2019-08-20 |
发明(设计)人: | 戴婷婷;焦彬彬;胡涛;徐月 | 申请(专利权)人: | 南京林业大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 | 代理人: | 邱兴天 |
地址: | 210037 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 疫霉菌 检测 检测引物 快速检测 靶标 反向环引物 反向内引物 反向外引物 正向环引物 正向内引物 正向外引物 高灵敏度 恒温扩增 技术平台 特异性强 田间土壤 疫病防治 重要意义 农药 病原物 可用 侵染 病害 | ||
1.樟疫霉菌的检测靶标
2.权利要求1所述的樟疫霉菌的检测靶标
3.权利要求1或2所述的检测靶标
4.权利要求1所述的樟疫霉菌的检测靶标
FIP:5′- CGAAGGACGAGGTGAAGGTGGACGCCCATACATCACATACG-3′;
BIP:5′- AAGGCCGGCTACATGTACTCGTCTCGGGCAAGATGACTTC-3′;
F3:5′- GTTCTGCGCGATTTGGTTAG-3′;
B3:5′-GCGGATCTTCCGATCTGGTA-3′;
LF:5′-AACGTGACGCCGGCAACAA-3′;
LB:5′- TGTTGCCTCCGGGCTGT-3′。
5.权利要求4所述的专用引物在检测樟疫霉菌中的应用。
6.一种检测樟疫霉菌的试剂盒,其特征在于:含有检测溶液,所述的检测溶液至少包括:1)权利要求4所述的专用引物的溶液。
7.根据权利要求6所述的检测樟疫霉菌的试剂盒,其特征在于:所述的检测溶液还包括:2)LAMP反应溶剂;3)DNA合成酶;4)羟基萘酚蓝。
8.权利要求6或7所述的试剂盒在检测樟疫霉菌中的应用。
9.一种检测樟疫霉菌的方法,其特征在于:提取待检微生物的DNA,以提取的DNA为模板,采用权利要求4所述的专用引物或权利要求6所述的试剂盒,进行对应的LAMP检测反应;观察反应溶液颜色变化,天蓝色表示检测为阳性,待检微生物为樟疫霉菌;紫色表示检测结果为阴性,待检微生物不是樟疫霉菌。
10.根据权利要求9所述的检测樟疫霉菌的方法,其特征在于:LAMP反应程序为:60℃~65℃,60~80min。
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