[发明专利]一种光磁双模态指示细胞，其制备方法，其检测方法及其在体内示踪中的应用

说明书

本发明提供了一种光磁双模态指示细胞的制备方法，其包括：将红细胞悬于细胞等渗液中，并加入荧光染料和核磁造影剂，得到染色混合物；以及孵育染色混合物，再用细胞等渗液清洗染色混合物中的细胞，最后收获细胞即得到光磁双模态指示细胞。该制备方法制得的光磁双模态指示细胞，以细胞作为光磁双模态示踪剂，可用于荧光及核磁共振双模态成像，并可用于从细胞水平到整体水平反应生物的生理状况。

技术领域

本发明属于生物成像领域，具体涉及一种光磁双模态指示细胞，其制备方法，其检测方法及其在体内示踪中的应用。

背景技术

近年来，生物成像技术的发展使得成像对象可以是机体，组织，细胞，甚至分子水平，其能够反映活体状态下分子水平的变化，并且对其生物学行为进行定性定量分析，这促进了药物研究和临床诊疗的发展。

光磁双模态影像技术，通过将荧光与MRI的影像探针进行“合二为一”，使其能用两种影像技术进行检测，克服单一影像技术的固有局限性。MRI是目前研究最为成熟的影像技术之一，它能在机体深层次亚毫米水平上提供高分辨率的组织信息和三维结构成像，在科研和临床中得到了广泛的应用。但由于成像分辨率低、灵敏度低，难以达到微米水平，临床应用受到很大限制。而光学显微成像技术却具有相当高的灵敏度，检测限可达到0.1-0.2微米，因此将MRI与光学成像技术进行联合，即能提供高分辨率的结构组织学信息，同时又能实现深部结构的的功能学显像，最终达到功能学显像与结构组织显像的完美统一。

光、磁成像需要借助光磁分子探针来增强信号。目前常见的光磁双模态探针的设计主要基于两种模式：第一种是荧光染料分子直接或间接螯合核磁信号元素构成。第二种方法是利用纳米技术构建功能化的纳米双模态体系，在纳米材料上修饰荧光染料或磁性颗粒构成。然而上述两种方法得到的光磁双模态探针都是溶液状态，难以从细胞水平反应生物的生理状况，例如在血管成像过程中难以直接检测血流中红细胞速度，并且分子探针容易渗透出血管壁，分布到血管壁周围组织中。

发明内容

本发明的目的是提供一种光磁双模态指示细胞的制备方法，其制备得到的光磁双模态指示细胞可用于荧光成像及核磁共振成像。

本发明的另一个目的是提供一种光磁双模态指示细胞，其可用于荧光成像及核磁共振成像，并可用于观察红细胞形态。

本发明的再一个目的是提供一种光磁双模态指示细胞的检测方法，其能够对光磁双模态指示细胞进行荧光成像及核磁共振成像。

本发明的还一个目的是提供一种光磁双模态指示细胞在体内示踪中的应用，其能够在荧光成像及核磁共振成像下实现光磁双模态指示细胞的体内示踪。

本发明提供了一种光磁双模态指示细胞的制备方法，其包括：将红细胞悬于细胞等渗液中，并加入荧光染料和核磁造影剂，得到染色混合物；以及孵育染色混合物，再用细胞等渗液清洗染色混合物中的细胞，最后收获细胞即得到光磁双模态指示细胞。

该制备方法制得的光磁双模态指示细胞，可用于荧光及核磁共振双模态成像，并可用于从细胞水平到整体水平反应生物的生理状况。

在光磁双模态指示细胞的制备方法的另一种示意性实施方式中，荧光染料选自萤黄CH二钾盐、异硫氰酸荧光素、罗丹明B和Alexa Fluor 594中的一种或多种的组合；核磁造影剂为钆喷酸葡胺。藉此可实现较好的荧光成像及核磁共振成像效果。